α葡糖苷的測定實驗——測量葡萄糖

己糖激酶

三乙醇胺-HCl NaOHD-葡萄糖ATPMgCl2NADP6-磷酸葡萄糖脫氫酶

分光光度計

實驗所需「試劑」具體見「其他」

0.98 ml 的實驗混合物

0.01 ml 己糖激酶

25℃ 時，于 340 nm 處吸收值上升。ε₃₄₀＝6.3×10³ l／（mol·cm）。

計算

試劑：

100 mmol/L 三乙醇胺-HCl/NaOH，pH 7.6（三乙醇胺－HCl，用 NaOH 調節）

1.0 mol/L D-葡萄糖（Mr＝180.2；18 g 溶于 100 ml 水中）

0.1 mol/L ATP（二鈉鹽，三水合物，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L MgCl₂（六水合物，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L NADP（二鈉鹽，Mr＝787.4；79 mg 溶于 10 ml 水中）

6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH，商品為 100～500 U/mg，應該準備約 5U/0.1 ml 的稀釋液）

己糖激酶（HK，約 200U/ml）