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  • 發布時間:2020-08-17 15:55 原文鏈接: β半乳糖苷酶的測定實驗

    實驗方法原理

    β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。


    乳糖+H2O → β-D-半乳糖+D-葡萄糖

    實驗材料 β-半乳糖苷酶

    試劑、試劑盒 磷酸鉀鄰硝基苯基 β-D-半乳糖苷

    儀器、耗材 分光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    實驗混合物:


    以 0.02 ml 酶溶液起始,然后 25℃ 下,在 405 nm處吸收值升高,ε450=3500 l(mol·cm)。

    注意事項

    其他

    試劑:


    0.1 mol/L 磷酸鉀,pH 7.6


    0.05 mol/L 鄰硝基苯基 β-D-半乳糖苷(ONPG,Mr=301.3;150 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.6)


    β-半乳糖苷酶提取于 E.coli(約 300 U/mg)


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