實驗方法原理
β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。
乳糖+H2O → β-D-半乳糖+D-葡萄糖
實驗材料 β-半乳糖苷酶
試劑、試劑盒 磷酸鉀鄰硝基苯基 β-D-半乳糖苷
儀器、耗材 分光光度計
實驗步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
實驗混合物:
以 0.02 ml 酶溶液起始,然后 25℃ 下,在 405 nm處吸收值升高,ε450=3500 l(mol·cm)。
注意事項
其他
試劑:
0.1 mol/L 磷酸鉀,pH 7.6
0.05 mol/L 鄰硝基苯基 β-D-半乳糖苷(ONPG,Mr=301.3;150 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.6)
β-半乳糖苷酶提取于 E.coli(約 300 U/mg)