• <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 發布時間:2019-09-14 07:04 原文鏈接: β果糖苷酶

    • 基本方案

               

    實驗方法原理

    β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶,β-呋喃糖苷酶,轉化酶,蔗糖酶。


    此酶水解 β-D-呋喃果糖苷中 β-D-呋喃果糖苷殘基的非還原端,特別是蔗糖。這是早期生化研究中最熱領域之一,Michaelis-Menten 等式就是來自于轉化酶的反應。實驗利用當蔗糖被切成葡萄糖和果糖的等克分子混合物時,平面偏振光的偏差發生倒轉(轉化酶)。這個反應可以用偏振儀連續記錄,實驗是 10 ml 樣品在 10 ml 比色皿中測得的,若使用其他比色皿可能發生改變。

    實驗材料

    轉化酶

    試劑、試劑盒

    乙酸緩沖液 D-(+)蔗糖 碳酸鈉

    儀器、耗材

    分光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    實驗混合物:


    恢復到 30 ℃


    0.1 ml 轉化酶


    培養一段時間(1~10 min),并加入 6 ml 1mol/L Na2CO3


    在 10 cm 的偏振儀比色皿中測其偏振性


    每分鐘分解 1 umol 的底物為 1 U 酶。

                展開           
    注意事項
    其他

    試劑:


    0.05 mol/L 乙酸緩沖液,pH 4.62(2.85 ml 乙酸,100%,Mr=60,溶于 800 ml H2O,用 1 mol/L NaOH 調至 pH 4.62,補充到 1 L)


    0.3 mol/L D-(+)蔗糖(Mr=342.3;10.3 g 溶于 100 ml H2O)


    1 mol/L 碳酸鈉(Na2CO3·10 H2O,Mr=286.1;28.6 g 溶于 100 ml H2O)


    從酵母中提取的轉化酶(約 300 U/mg)

    展開


  • <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 东京热 下载