一文讀懂生物顯微鏡的基本使用流程

【引言】

生物顯微鏡是一種用于觀察生物切片、生物細胞、細菌以及活體組織培養、流質沉淀等的精密光學儀器。它還能夠觀察其他透明或半透明物體、粉末和微小顆粒等物體。

生物顯微鏡已有三百多年的歷史，最早由荷蘭人列文虎克首次應用放大鏡觀察微生物和細菌。現今，光學顯微鏡設備被廣泛應用于多個領域，包括細胞學、寄生蟲學、腫瘤學、免疫學、遺傳工程學、工業微生物學和植物學等。隨著技術的不斷進步，生物顯微鏡的性能指標如數值孔徑、分辨率、放大率、焦深、視場寬度、覆蓋差和工作距離也在不斷提升。

【生物顯微鏡簡介】根據定位級別，生物顯微鏡可以分為學生級、實驗級和研究級。以高校醫學類教學實驗中常用的生物顯微鏡為例進行探討。顯微鏡具有出色的性價比和擴展性能，包括光學部分（目鏡、物鏡、照明裝置）和機械部分（底座、鏡臂、載物臺、物鏡轉換器、鏡筒與鏡體）。此外，電路部分主要由分析變壓、穩壓、穩流、分壓、分流等線路組成。近年來，隨著技術進步，還可以進一步配用300萬以上像素的USB攝像頭，可連接電腦顯示，并需要自行安裝應用程序，從而增加了其展示和抓圖等拓展功能，更適合于課堂教學的使用。

【常見故障分析與解決】

常見的故障分析與解決包括鏡頭受潮、灰塵、霉菌生長以及朦朧光。最常見的光學部分故障是由于鏡頭受潮、灰塵、長霉菌以及朦朧光引起的。學生在實驗課中可能會因未調節好焦距而以為鏡頭模糊，或者用手擦拭目鏡頭，或者在顯微鏡下留下指紋或污漬。在潮濕的南方氣候條件下，顯微鏡的鏡頭容易受潮或生霉菌。朦朧光通常是因為清潔鏡頭不干凈所引起的。如果出現鏡頭內部污染或霉變，必須進行拆開清洗。清潔時，可使用棉花或擦鏡紙蘸取乙醚酒精，輕輕以同心圓運動方式擦拭。高倍鏡和油鏡需要按順序裝配。

另一個常見的故障是顯微視野中出現特定的污點或不明圖像。這可能是因為目鏡或試樣標本被污染或刮損所致。可通過旋轉目鏡來判斷污點是否跟隨旋轉，以確定是否存于目鏡上；然后移動試樣標本，如污點跟隨移動，即可確定污點位于標本片上；最后，檢查物鏡的前后鏡頭，確定是否存在物鏡上，并根據污損情況進行清潔處理。

故障三可能涉及到定位裝置失靈、物鏡轉動困難或載物臺自行下滑。這些機械故障會直接影響成像質量。解決這些問題需要首先通過工作原理分析是機械故障還是光學系統故障。在處理復雜故障時，應遵循“先易后難，先外后內”的原則，但不要只關注局部而忽略整體。以載物臺自動下滑為例，可以通過旋緊鎖緊手輪以增加齒輪和齒條之間的嚙合間隙，或者用定位手輪固定平臺，以確保觀察的準確性。如果問題無法解決，可以通過調整彈片的高低來增加摩擦，從而穩定載物臺。具體做法包括拆卸微動手輪、取出波紋彈片，適當調整波紋程度后重新安裝。

最后，光源（燈泡）問題是常見的電路系統故障。主要現象包括開關接通時燈泡不亮或突然燒壞。這些問題可能是由于未正確調節光源的光量開關旋鈕或搬動顯微鏡時導致電源線松脫所致。解決方法包括將顯微鏡的光源插頭插到電源適配器上，通過低壓變壓器接通電源。如果需要更換燈泡，務必在斷開電源的情況下進行

【應用】生物顯微鏡在醫療衛生單位、高等院校、研究所等領域得到廣泛應用，用于觀察微生物、細胞、細菌等在培養液中的繁殖分裂過程。在細胞學、寄生蟲學、腫瘤學、免疫學、遺傳工程學等領域具有重要應用價值。

【基本使用流程】

1. 根據觀察試樣選擇合適的放大倍數，確定配物鏡和目鏡；

2. 將試樣置于載物臺中心，標本夾固定；

3. 轉動粗準焦螺旋，使試樣觀察表面接近物鏡；

4. 反向粗準焦螺旋，使在目鏡中可以看到模糊形象；

5. 轉動細準焦螺旋，至成像清晰；

6. 調節孔徑光闌，選用合適的濾鏡片，優化成像質量；

7. 調整縱橫向移動手輪，觀察試樣的目標部位；

8. 如有連接攝像頭，可通過攝像頭觀察并攝像；

9. 實驗結束后，關閉儀器，蓋上防塵罩。