輔助檢查
丁型肝炎的特異性診斷方法為從肝臟和血清檢測HDAg或HDV-RNA，或從血清檢測抗-HD、抗-HDIgM，均做為診 斷的依據。
1、HDAg
用免疫酶法或放射免疫法檢測血清HDAg，如為陽性，有助于早期診斷。慢性HDV感染時，由于血清中抗-HD滴度高，HDAg多以免疫復合物形成存在，須用免疫印跡法（WesternBlot）分離HDAg，方法較復雜。肝內HDAg可用免疫熒光法或免疫組化技術檢測，可發現HDAg位于肝細胞核內或位于肝細胞漿中，有利于診斷。
2、抗-HD、抗-HDIgM
可用免疫酶聯法或放射免疫法檢測血清抗-HD，是診斷丁型肝炎常用的方法。于急性HDV感染的3～8周內，絕大多數均可檢出抗-HD，可持續至恢復期，由于個例其抗-出現時間與程度不同，在急性感染時數周內須多次檢測。抗-HDIgM出現較早，一般持續2～20周，用于早期診斷。高滴度抗HDIgM是診斷急性丁型肝炎的標志。當慢性HDV感染或HDV重疊感染時，抗-HD和抗-HDIgG是識別慢性丁型肝炎的主要標志。目前檢測的抗-HDIgG是識別慢性丁型肝炎的主要標志。目前檢測的抗-HD，實際以IgG型為主。
3、HDV-RNA
采用cDNA探針斑點雜交法檢測；肝組織內HDV-RNA用原位雜交或轉印雜交法檢測。HDV-RNA用原位雜交或轉印雜交法檢測。HDV-HDV陽性是HDV復制和HDV感染的直接證據。檢測血清HDV-RNA可用逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR法）。
總之，血清學檢測，可檢出部分HDV感染的患者，尚有相當一部分患者只有從肝組織檢測HDAg才能確診。
診斷
根據臨床表現特征的診斷甚為不易，下述線索可資提示:①HDV流行區內HBsAg攜帶者發生的肝炎。②急性乙型肝炎出現雙峰性血清ALT和膽紅素濃度波動。③病情已趨穩定的非活動性病例突然出現肝炎活動，或慢性乙型肝炎病程中表現進行性惡化。④HBV復制指標本已降低或消失而臨床表現反見惡化的病例。但是，確診則決定于HDV血清學標志的檢測。
血清學診斷：HDV抗原、抗體可同時存在于血清。篩檢中，常以抗-HD檢測為第一步驟。抗-HD檢測有放射免疫法(RIA)和酶吸附法(EIA)。
抗-HDIgM在臨床發病的急性早期便可出現，持續3~9周，于恢復期消失；倘若轉為持續感染狀態，則可持續陽性，且以7S型為主，而在病情反復活動時可有19S型出現。因此，可作為同時感染和重疊感染急性發病的鑒別。
急性發病時，在抗-HDIgM滴度開始下降之后，抗-HDIgG滴度顯示上升，但亦有限，并于2~18個月內消失。持續高滴度抗-HDIgG的存在是慢性持續性HDV感染的主要血清學標志。
采用cRNA探針斑點雜交法或逆轉錄-多聚酶鏈反應檢測HDVRNA為確定HDV感染的最敏感和直接的證據。
病程早期即HDAg血癥階段用EIA法或RIA法可檢測血清HDAg而有助于早期診斷。在慢性感染時，因血中持續存在高水平的抗-HD，HDAg多以免疫復合物的形式存在，須用免疫印跡法分離HDAg，可檢測到HDAg-P24和HDAg-P27蛋白。
組織學診斷:肝活檢標本肝細胞核內HDV(HDAg或HDVRNA)組織染色為確診手段。HbsAg陽性肝組織中HDAg檢出率達9.6%，其感染率自當更高。酶抗體法(過氧化酶)或熒光抗體法均具特異性診斷價值，但陰性病例的血清申未必都查不出抗-HD。