該方法的基本原理為:采用150g/L的三氯乙酸溶液(在混合物中的最終濃度約為120g/L )沉淀乳中的蛋白質,用過濾法分離沉淀和溶液,沉淀部分含蛋白態氮,非沉淀部分(溶液)含非蛋白態氮。將濾渣收集起來,再用雙縮脲法進行定氮。即可得出樣品中的真蛋白含量。三氯乙酸-雙縮脲比色法可以較好地檢測出乳中的真蛋白。
該方法是對凱式定氮法的改進,在樣品檢測前先將其中的蛋白質沉淀,可以很好的排除三聚氰胺、尿素等非蛋白氮的干擾。后期采用雙縮脲法對濾渣進行蛋白質含量測定,且操作簡便迅速,可提高工作效率,但靈敏度比較低,測定范圍為1～20mg蛋白質,適用于精度要求不高的蛋白質含量測定。