春暖花開，萬物復蘇，一派勃勃生機。如此美景，小P約了朋友小E一起踏上春天的腳步，沐著愜意的陽光，撫著溫柔的春風，吻著四溢的花香，去享受生活的小確幸。
小E是食品檢測實驗室一員，小E一見到小P，就把近期的苦水全倒出來了。為了應對日益增加的業務量，小E最近每天加班加點，除了吃飯睡覺，其他時間都在實驗室度過（慶幸已有女朋友，不然以這種狀態要光棍一生了）。這不前兩天關于咖啡可能含有致癌物-丙烯酰胺的事件引起了一陣恐慌，帶來了很多檢測咖啡中丙烯酰胺的單子，領導催我休完假回去趕緊做完這一批樣品。由于咖啡基體較復雜，HPLC，GC/MS檢測前通常需要對其進行提取、衍生、凈化等前處理步驟，操作復雜且費時；雖然LC/MS/MS法無需對丙烯酰胺進行衍生，但還需過SPE柱進行處理，面對巨大的樣品量，又將是一輪加班的日子，想想都難過。
聽完小E的抱怨，小P不緊不慢的說，你知道PerkinElmer的QSight三重四極桿液質聯用儀嗎？擁有超高的靈敏度，并且臟不怕多不怕，無論樣品基質多么復雜，檢測需求多么困難，都能輕松應對挑戰、快速獲得滿意結果。歐盟發布指令（EU）2017/2158（將于2018年4月11日實施），規定了丙烯酰胺的限量水平：焙烤咖啡：400μg/kg，速溶咖啡：850μg/kg，咖啡替代產品：500-4000
μg/kg。QSight不怕臟的特性，對于咖啡中丙烯酰胺的檢測，無需復雜的前處理，直接提取，即可進樣分析，且滿足檢測要求，大大提高了工作效率。
是不是有疑問，咖啡基質這么復雜的樣品，直接提取進樣分析，儀器的重現性能好嗎？測出來的數據能看嗎？
接下來，我們以具體解決方案和數據說話：
樣品前處理方法：準確稱取試樣1 g（精確到0.001 g），加入0.1 mg/mL13C3-丙烯酰胺內標工作溶液50μL，再加入超純水50 mL，振搖10 min后，于8000 r/m離心5 min，取上清液待1mL，定容至10mL，混勻，過0.22μm微孔過濾頭至進樣瓶中，待LC-MS/MS 測定。
LC-MS/MS儀器方法：
1.液相色譜參數：液相色譜儀：PerkinElmer UHPLC系統，具體參數見表1。
表1液相色譜儀參數表
液相色譜流動相: A:0.1%甲酸水溶液 B:乙腈; 時間(min)流速 (mL/min)%A%B100.4901022.00.49010 |
色譜柱：Brownlee Validated AQ C18, 2.1x100 mm, 3.0μm |
分析時間: 2 min; |
柱溫： 30℃ |
2.質譜參數：
以下參數以PerkinElmer QSight 220TM三重四極桿質譜儀為例，目標化合物質譜參數見表2和表3。
表2化合物質譜參數列表
化合物 | Q1/m/z | Q3/m/z | CE/eV |
丙烯酰胺 | 72.0 | 55.1 | -16 |
72.0 | 44.1 | -40 | |
72.0 | 27.3 | -30 | |
13C3-丙烯酰胺 | 75.0 | 58.1 | -16 |
表3質譜離子源參數
離子源 | 大氣壓電噴霧離子源，正離子模式 |
噴霧電壓 | 5500V |
反吹氣 | 100 |
霧化氣 | 150 |
離子源溫度 | 500℃ |
采用PerkinElmer AQ C18色譜柱，使丙烯酰胺獲得了良好的色譜保留，圖1中展示了濃度為0.5μg/L的提取離子色譜圖。
圖1濃度為0.5μg/L下丙烯酰胺的提取離子色譜圖
圖2丙烯酰胺標準曲線，濃度范圍：0.2 μg/L-100.0 μg/L
在優化的實驗條件下，對咖啡樣品進行添加標準回收實驗，咖啡樣品中丙烯酰胺的回收率為73.7%-90.5%，相對標準偏差RSD值為1.4-3.8%，實驗結果顯示本方法回收率和重現性均可滿足咖啡中丙烯酰胺的分析要求。
結論：該方案建立了快速，高靈敏度和可靠的LC-MS/MS實驗方法測定咖啡中丙烯酰胺的含量。在0.2-100 μg/L范圍內具有良好的線性（R2≥0.998）。本方法前處理簡單，靈敏度高，回收率良好以及優異的重現性，完全滿足咖啡及其他食品中丙烯酰胺的日常檢測要求。
小E聽后，感慨道，工欲善其事必先利其器，個人能力很重要，儀器工作效率更重要，是時候找領導溝通換臺儀器了，這樣以后會有更多的時間享受如此良辰美景呢。