丙酮酸激酶的測定實驗

PK，ATP：丙酮酸磷酸轉移酶。

有其他激酶的伴隨，這個反應的直接實驗：

例如，可以應用 P³² 標記。由分光光度測定出，這個反應與 LDH 反應偶聯，繼續 NADH 的氧化反應：

酶樣品

三乙醇胺-HCl KOH KCl MgCl2 磷酸烯醇式丙酮酸 ADP NADH LDH

分光光度計

實驗所需「試劑」具體見「其他」

0.98 ml 實驗混合物

0.02 ml 酶樣品

25 ℃ 時，于 340 nm 處吸收值降低，ε₃₄₀＝6.3×10³ l/（mol·cm）。

試劑：

0.1 mol/L 三乙醇胺-HCl/KOH，pH 7.6（氯化三乙醇胺，Mr＝185.7；18.6 g 溶于 800 ml H₂O，用 1 mol/L KOH 調至 pH 7.6，再補充到 1000 ml）

0.5 mol/L KCl（Mr＝74.6；373 mg 溶于 10 ml 水中）

0.25 mol/L MgCl₂（六水合物，Mr＝203.3；508 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L 磷酸烯醇式丙酮酸（PEP，三環己基銨鹽，Mr＝465.6；46.6 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L ADP（二鈉鹽，Mr＝471.2；471 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L NADH（二鈉鹽，Mr＝709.4；71 mg 溶于 10 ml 水中）

LDH （商業產品有大約 500 U/mg，準備溶液時需 150 U/0.1 ml）