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  • 發布時間:2019-03-31 20:49 原文鏈接: 丙酮酸鐵氧還原蛋白還原酶的測定實驗

    實驗方法原理


    丙酮酸合酶,丙酮酸:鐵氧還原蛋白 2-氧化還原酶(乙酰-CoA 化)


    丙酮酸 + CoA + 氧化型細胞色素 c ? 乙酰-CoA + CO2 + 還原型細胞色素 c


    實驗材料

    酶樣品

    試劑、試劑盒

    Tris-HCl細胞色素 c丙酮酸CoA

    儀器、耗材

    分光光度計

    實驗步驟


    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    0.98 ml 實驗混合物


    0.02 ml 酶樣品


    25℃ 時,于 550 nm 處吸收值增長。細胞色素 c 的吸收系數(還原-氧化) ε550=21×103 l/(mol·cm)。

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    注意事項
    其他

    試劑:


    0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.3


    0.01 mol/L 細胞色素 c(Mr=12380,620 mg 溶于 5 ml 水中)


    0.10 mol/L 丙酮酸(丙酮酸鈉,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)


    0.01 mol/L CoA(游離酸,Mr=767.7;CoA ·Li3,Mr=785.4;23 mg 溶于 3 ml 水中)



    展開


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