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  • 發布時間:2015-11-05 15:35 原文鏈接: 東南大學顧寧教授團隊的周昕博士發Naturematerials文章

      分子診斷是當代醫學發展的重要前沿領域之一,內容主要包括對DNA、RNA、蛋白分子(包括抗原和抗體)及microRNA等biomarker分子的診斷。目前分子診斷的主題從最初的DNA定性分析發展到對未知DNA的高通量測序、DNA的定量分析、mRNA的轉錄水平測定、蛋白表達水平以及microRNA等的定量測定。確定這幾類分子在人體樣品(細胞、組織或體液)中的準確含量,可以判定人體是否感染病原體、疾病的進展情況以及判斷治療效果,為疾病預警和干預、個性化診斷和預后提供決策性依據,是分子診斷的核心內容。

      在臨床上廣泛使用的Elisa和PCR技術,都是相對定量,必須用標準品進行平行反應來相對定量。近些年,納米技術用于分子診斷的方法發展迅速。代表性的有基于納米金標記的顏色法、拉曼光譜指紋以及生物條形碼技術。另外,還有其它許多納米材料形成的各式各樣的結構(量子點、表面增強顆粒、樹形結構、納米管、納米線、納米懸臂結構、納米電化學系統)用于構建各種分子診斷系統。這些基于納米技術的定量檢測方法,最終的檢測信號皆是集團信號,不能實現一個信號對應一個目標,也就是說,不能尋址。

      我們課題組深諳生物學種族的特性及納米技術的優點,利用了T7噬菌體的可修飾性以及快速生長繁殖的特性(一個T7噬菌體在3小時即可在其宿主平板上生長出一個肉眼可見的噬菌斑),采用生物分子操作技術與納米合成修飾技術,制備了一種特殊的探針(一個納米金上修飾一個T7噬菌體),實現了一個肉眼直接計數目標的可尋址(如,一個綠色噬菌斑對應一個A目標,一個紅色噬菌斑對應一個B目標)的絕對定量檢測策略(見示意圖)。

      該策略通過對合成的microRNA純凈樣品以及真實樣本(細胞、血清及腫瘤組織)中microRNA的肉眼計數,證明了其高靈敏度(3 aM)、可尋址及肉眼直接計數的特性。

      該檢測策略具有檢測對象的通用性。對納米粒子上的配體進行適當替換,不僅可檢測核酸類分子,還可檢測蛋白類分子,以及病毒等病原體。若將此策略進一步發展為自動化的檢測系統,將可實現更快速的定量分析,具有良好的應用前景。

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