一步法,使用特殊引物,全程只設置一個溫度即可完成擴增.這種特殊引物有ZL.二步法即循環擴增中設置2個步驟,這個方法主要擴增短片段,一個是95度變性,另一個是退火與擴增的溫度,一般設置在55~60之間,當然也有例外.三步法就是平常見到的方法,擴增循環有三步,變性,退火,延伸.