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  • 發布時間:2020-09-01 12:06 原文鏈接: 中樞神經系統藥理學研究中的選擇與應用(二)

    (三)抗驚厥和抗震顫麻痹藥實驗

      1.化學物質引起驚厥法:常選用小白鼠,也可采用大白鼠,貓或兔則可作特殊觀察。采用戊四唑驚厥法,在小鼠皮下注射85mg/kg(最大也有用150mg/kg,此劑量已是LD98),腹腔注射為100mg/kg(最大175mg/kg)作實驗時,不同種系小鼠可有不同反應,Bastian曾比較過由8處供應的4個種系的小鼠,其中CFW種小鼠在持續驚厥后立即死亡的發生率為100%,而其它3種有10~30%動物在持續驚厥后存活很長時間不死亡。因此作藥物活性比較時,應選用同一品種。

      2.聽源性發作法:某些敏感動物(主要是鼠類)在受到強鈴聲刺激時,能產生一種定型的運動性發作,稱為“聽源性發作”(Audiogenic seizure),這是研究抗癲癇藥物的一種常用模型。如果選用DBA/2J系小鼠(聽源陽性鼠)供科研用。也可采用一些藥物來提高大鼠聽源性發作陽性率。如在亞驚厥劑量的戊四唑(16mg/kg)、士的寧(1mg/kg)、若味毒(1mg/kg)或咖啡因(150mg/kg)作用基礎上,給予鈴聲刺激,可使部分聽源陰性鼠也能產生發作。上述藥物所致的陽性發作率分別為47.%、66.5%、38.4%、18.1%。

      3.慢性實驗性癲癇模型:各種動物的大腦皮質感覺動物區是致癇敏感區之一,特別是猴極易在此區形成癲癇病灶。將鋁劑注入到中央前回和中央后回比單注入中央前回易于形成;將鋁劑注入到猴和貓的顳葉前部,可引起運動性和精神運動性發作;大腦皮質其區區域不敏感。此外,還報導注于杏仁殼核也可引起發作。病理模型的形成以猴最為敏感,貓次之,其他動物不敏感。所以,常選用猴作此實驗,麻醉后無菌條件以猴最為敏感,貓次之,其他動物不敏感。所以,常選用猴作此實驗,麻醉后無菌條件下將消毒后的4%氫氧化鋁乳劑用皮內針頭注到前腦和后腦皮質感覺運動區,注射兩點或數點,勿使藥液外流于軟腦膜內,可在注后35-60天,出現自發性癲癇發作。如果鋁劑形成的病灶嚴重,也可在注后2-3周發作。

      鈷可引起大白鼠、小白鼠和貓的慢性實驗性癲癇,而猴對鈷卻不敏感,常選用大白鼠,在麻醉消毒下,開顱將消毒的市售鈷粉(200篩孔)約30mg,放在皮層運動區的前側(面積為10mm2),安好電極,縫合,動物約在放置鈷粉后2~3周,出現置鈷對側肢體發生陣攣,少數動物于局部陣攣后出現全身發作。

      點燃效應(Kindling Effect,KE)引起發作是一種較好的慢性實驗性癲癇模型。其形成方法是以一定的刺激強度和時間間隔刺激腦的一定部位。動物常選用大白鼠、貓、猴、兔等。刺激強度:大白鼠杏仁核和海馬為50~400μA,貓為100~500μA,猴和狒狒為200~400μA。

      4.抗震顫麻痹藥物篩選方法:目前篩選抗震顫麻痹藥物的方法,常采用藥物誘發震顫和損傷錐體外系某些核團以誘發震顫。如常選用豚鼠藥物誘發震顫法,按0.002%水楊酸毒扁豆堿溶液以0.3mg/kg劑量注往前右側頸動脈,注射速度要嚴格控制在20~25秒之間,并在注射時暫夾住左側頸動脈,以保證藥液進右側椎動脈。動物多于注射毒扁豆鹼后15~20秒出現癥狀,典型陽性反應是頭左偏,身體強迫性向左側旋轉作環形運動,同時可伴有眼球左偏并向對側震顫,全部癥狀持續5分鐘。還可選用小白鼠,按25mg/kg腹腔注射0.25%檳榔鹼溶液;腹腔注射0.5%匹魯卡品,50mg/kg;腹腔注射0.0014%氯化震顫素0.14mg/kg,均可出現明顯震顫。

      (四)鎮痛藥物實驗

      目前國內外篩選鎮痛藥的常用致痛方法,概括有物理性(熱、電、機械)和化學性刺激法。這些方法各有優缺點,其中以熱、電刺激及鉀離子皮下透入致痛法使用居多。常用的動物有小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、狗、猴等。動物實驗中常用的痛反應指標為嘶叫、舔足、甩尾、掙扎及皮膚、肌肉抽搐等。

      應用猴子研究鎮痛劑的依賴性較為理想,因為鎮痛劑對它的信賴性表現與人較接近,戒斷癥狀又較明顯且易于觀察,已成為新鎮痛劑進入臨床試用前必須的試驗。

    (五)解熱、抗炎藥實驗

      炎熱和炎癥都是臨床常見的癥狀。實驗室常用病毒、細菌、細菌產物、內毒素和抗原抗體復合物引起發熱,也有用微量前列腺素(PGE)直接注入動物腦室或丘腦下部原抗體復合物引起發熱,也有用微量前列腺素(PGE)直接注入動物腦室或丘腦下部進行致熱。

      常用的致炎方法有以血管通透性增加為主的足蹠浮腫法、無菌性胸(腹)膜炎、佐劑性關節炎、紫外線紅斑法、放射線照射法以及其它菌性炎癥;有觀察白細胞游走的羧甲基纖維素囊法、大白鼠角膜法、毛細管法和小室濾膜法;有制造肉芽腫模型的棉球法、紙片法、瓊脂法、巴豆油囊袋法和受精雞卵法等。此外亦有用妊娠大白鼠子宮自發收縮為指標,間接反應炎癥過程的方法。

      實驗性炎癥應該選用哺乳類動物,并根據實驗模型的不同采用不同種屬的動物。例如足跖浮腫模型須采用大白鼠,形成過敏性炎癥應首選豚鼠,而家兔則最易產生發熱反應。此外,幼小動物(如小狗、小兔、小白鼠)炎癥反應相當微弱,甚至可以完全不出現。家兔對刺激的炎癥反應與其毛色有關,白毛兔比有色毛兔的炎癥強度和炎癥經過均較劇烈。曾致炎組織比初次炎癥刺激時反應微弱,因此不宜在同一部位反復復制炎癥。

      動物種屬、年齡和形態特點,對發熱反應有明顯影響。例如小白鼠、豚鼠,有時包括大白鼠,均不宜用于復制發熱模型。這些動物的恒溫機能差,對發熱刺激的反應低,有時對熱源性物質的刺激體溫反而下降。而兔的發熱反應典型恒定,因而常用。但須注意,家兔年齡在20~30天以內者可不發生發熱反應,而體重在2kg左右者,結果最為滿意。大白鼠則以體重150~200g為最適宜。同種動物形態上的差異也會影響到體溫反應,如毛家兔和長毛狗的體溫比短毛者上升的慢。狗對外界環境的變動反應穩定,但小白鼠和大白鼠的體溫波動很大。動物長時間捆綁時,體溫可顯著降低。當動物掙扎時則可使體溫升高。因此通常把動物固定在木盒內,以限制其多余的活動。給動物注射菌液或內毒素時,注射量并不與發熱反應強度成正比。注入量過大時的體溫可不上升,故劑量的選擇必須恰好處。靜注菌液或內毒素等引起的發熱較皮下注射迅速而強烈。但注射化學刺激劑則必須注射到動物皮下才會引起較強反應。可能是該類物質刺激皮下組織造成無菌性炎癥所致。

      (六)中樞興奮藥實驗

      去水嗎啡對不同種屬動物具有不同的作用,對某些動物(如狗、貓)可引起頑固性嘔吐;對另一些動物(如馬、牛、嚙齒類動物)則可引起驚恐、運動性增高和強制性的嚙齒動物(Guawing);鴿則引起強烈性的啄鑿。為了研究藥物對去水嗎啡的作用,多認為選用具有溫和嚙齒作用的小白鼠為宜。以觀察藥物能否拮抗去水嗎啡引起的小白鼠嚙齒動作,來測定其中樞興奮的強度。

      引起食欲抑制的藥物大多為中樞興奮藥,所以測定藥物對動物食物攝取量的影響。可作為中樞興奮藥的篩選指標之一。常選用貓來研究食欲抑制藥物有無耐藥性及其發生速度。亦可選用小白鼠或采用全硫葡萄糖(Aurthioglucose)喂飼的小白鼠肥胖模型來研究食欲抑制藥。


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