中藥注射劑變態反應研究中的動物選擇

現在藥品的上市需要經歷臨床前動物實驗和大規模嚴格的臨床試驗確定藥物的安全性及有效劑量，以及與其他藥物的配伍程度等研究之后才能通過審批。近年來部分中藥注射劑如魚腥草注射液、刺五加注射液因嚴重不良反應暫停銷售和使用，中藥注射劑的臨床安全性問題愈發引人關注。由于臨床前動物實驗數據對臨床實驗應用尚有差距，并且中藥注射劑不良反應發生的影響因素較多，所以在做好中藥注射劑的臨床前安全性評價之外，還需要進行中藥注射劑上市后臨床安全性再評價。

1、中藥注射劑引起變態反應的機制

中藥注射液嚴重不良反應中尤以過敏反應的比例為最高,且反應類型多為速發型變態反應。由于中藥注射劑是注射給藥的，這種給藥方式是藥物和藥物賦形劑等直接進入血液，打破了人機體的內平衡環境，更容易出現不良反應。中藥注射劑所含的致敏原（變態原）進入體內后，可刺激機體產生相應的抗原或致敏淋巴細胞，使機體呈敏感狀態，引起人體組織損傷或生理功能紊亂。相同的致敏原再次進入人體內，即可發生超敏反應。中藥注射劑引起變態反應的致敏原包括中藥注射劑所含的活性成分、未提純的雜質、制劑賦形劑以及制劑不穩定產生的分解產物等。

建立針對中藥致敏原的敏感動物模型和標準評價方法，為中藥注射劑的臨床前安全性評價提供了幫助，有助于擴大其在臨床上的應用。臨床前動物實驗中的動物模型對我們了解藥物過敏反應復雜的免疫學及病理學機制起到了很重要的作用。美迪西根據客戶的需求提供各種有效的動物模型，用來檢測藥物的有效性。實驗動物有非人類靈長動物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠等各種種類。主要動物模型包括：腫瘤疾病模型、消化系統疾病動物模型、內分泌疾病動物模型、代謝疾病動物模型、炎癥和免疫性疾病動物模型、神經系統疾病動物模型等。

一般認為豚鼠是進行過敏性試驗的最敏感動物，但因其與人類存在較大的種屬差異，不能完全反映人的情況，即臨床前注射劑安全性評價中過敏反應的高陰性率與臨床存在的高陽性率存在很大的差異，相關性較差。BN大鼠是高免疫球蛋白（尤其是IgE）應答品系，BN大鼠動物模型是一種有前途的致敏動物模型。

2、中藥注射劑臨床前動物實驗的動物選擇

以清開靈注射液、雙黃連注射液及其中的疑似致敏成分黃芩苷、綠原酸作為致敏原，以天花粉蛋白為陽性對照，通過觀察過敏反應發生率、過敏反應程度、組胺增長率、靶器官病變率和病變程度，對BN大鼠和豚鼠在評價中藥注射液過敏反應中的適用性進行比較，篩選出適合評價中藥注射液過敏反應的動物模型。并通過全身主動過敏試驗(ASA)和被動皮膚過敏試驗(PCA)對該模型的特異性進行研究，在此基礎上,通過對致敏參數(致敏劑量、致敏次數、致敏途徑、致敏時間間隔)和激發參數(攻擊劑量、攻擊途徑、攻擊間隔、攻擊體積)的明確，建立一套適合評價中藥注射液過敏反應的規范化研究方法。

在建立的動物模型上，以清開靈注射液、雙黃連注射液、魚腥草注射液、穿琥寧注射液、燈盞花素注射液為受試樣本，以青霉素為陽性對照，通過對肥大細胞脫顆粒、IgE抗體含量、血清中過敏介質和Th1/Th2型細胞因子含量的研究，對中藥注射液過敏反應的機制進行探討。

最后得出以下研究結論：

（1）與豚鼠比較，BN大鼠可能為評價中藥注射液過敏反應的適宜動物模型；

（2）在BN大鼠動物模型上，能產生特異性的全身主動過敏反應和皮膚被動過敏反應；

（3）采用BN大鼠模型對中藥致敏原進行評價時，其規范化參數為：致敏劑量為人臨床等倍劑量、致敏次數為3次、致敏間隔為1日、致敏途徑為靜脈注射，攻擊劑量為致敏劑量的2倍、攻擊途徑為靜脈注射、攻擊次數為1次、攻擊時間間隔為末次致敏后的第14天；

在BN大鼠動物模型上，中藥注射液可引起IgE抗體介導的速發型過敏反應，其過敏反應機制可能與以下環節相關：①促進肥大細胞脫顆粒后,釋放組胺、5-羥色胺、前列腺素D2和白三烯B4等過敏介質；②誘導Th1/Th2細胞分泌的細胞因子向Th2偏移,從而促進IgE抗體合成。

    試驗結果證明，在評價中藥注射液過敏反應中，BN大鼠的敏感性明顯高于豚鼠，說明BN大鼠可能為評價中藥注射液過敏反應的適宜臨床前動物實驗模型。