乙型病毒性肝炎的病原為乙肝炎病毒，縮寫為HBV，乙型肝炎病毒為DNA病毒。基因組是雙鏈、環形、不完全閉合DNA。病毒最外層是病毒的外膜或稱衣膜（envelope)，其內層為核心部分（core)，核蛋白即是核心抗原（HBcAg)，不能在血清中檢出。HBsAg陽性者的血清在電子顯微鏡下可見3種顆粒，直徑為22nm的圓形和絲狀顆粒，還有較少的直徑為42。的球形顆粒，又稱為Dane氏顆粒，是完整的HBV顆粒。
HBV對外界環境抵抗力較強，在30℃～32℃時可存活至少6個月，在一20℃時可存活15年。在121℃高壓2Omin.100℃于烤1h、100℃直接煮沸10mm均可滅活HBV。含氯制劑、環氧乙烷、戊二醛、過氧乙酸和碘伏等也有較好的滅活效果。