基本方案
| 實驗方法原理 |
乙酰膽堿水解酶(AChE) 乙酰膽堿+H2O → 膽堿+乙酸 |
|---|---|
| 實驗材料 | 乙酰膽堿酯酶 |
| 試劑、試劑盒 | 磷酸鉀 氯化乙酰膽堿 白明膠 氫氧化鈉 |
| 實驗步驟 |
空白對照:保持 pH 7.4,持續記錄幾分鐘每次 0.01 mol/L 氫氧化鈉的用量。 樣品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.0,并記錄 5 min 每次 0.01 mol/L 氫氧化鈉的用量。 計算 25℃ pH 7.4 時,每分鐘一個單位水解的 1 umol 乙酰膽堿。
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| 注意事項 | |
| 其他 |
試劑: 0.02 mol/L 磷酸鉀,pH 7.0 0.005 mol/L 氯化乙酰膽堿(Mr=181.7;91 mg 溶于 100 ml 水中) 0.01% 白明膠,包括 0.2 mol/L 氯化鈉和 0.04 mol/L 氯化鈉(0.1 g 白明膠,11.7 g NaCl,8.1 g MgCl2· 6 H2O 溶于 1 L H2O) 0.01 mol/L 氫氧化鈉標準溶液作為滴定劑,加入自動滴定器的滴管中 乙酰膽喊酯酶,用 0.02 mol/L 磷酸鉀 pH 7.0 稀釋到約 20 U/ml
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