本菌為長桿菌，寬度不大于2μm，長度不定，通常呈細絲狀卷曲交織在一起，幼齡時單在或成對。革蘭氏染色陽性，無運動性，不產生芽胞，美蘭染色可見菌體內有異染顆粒。
微需氧或厭氧，在微氧和含5%CO2的條件下生長良好。在含有蛋白胨、葡萄糖、酵母浸汁、吐溫80的西紅柿汁培養基上生長良好，菌落通常粗糙，直徑1-3mm，白色至淺灰色致密或絨毛狀。最適宜生長溫度為37-40℃，最高生長溫度為48℃，15℃停止生長。適宜pH值為6，牛乳凝固，最終產酸約達1.6%乳酸，同型發酵產D-乳酸。
乳酸桿菌可從牛奶和干酪中分離得到，是干酪制造中常用的菌種。