二乙酰肟法測定血清尿素氮實驗

一、 實驗試劑：

l. 堿性試劑：在三角燒瓶中加蒸餾水約100ml，然后加入濃硫酸44ml及85%H3PO466ml冷至室溫，加入硫氨脲50mg及硫酸鎘2g溶解后加蒸餾水稀釋至1升，置棕色瓶放冰箱保存，可穩定半年。

2. 二乙酰-肟溶液：稱取二乙酰-肟20g，加蒸餾水約900ml溶解后，再用蒸餾水稀釋至1升置棕色瓶中，貯存放于冰箱內可保存半年不變。

3. 尿素標準貯存液（100mmol/L）：稱取干燥純尿素（MW=60.06）0.6g，溶解于水中并稀釋至100毫升，加0.1g疊氮鈉防腐，置冰箱內穩定六個月。

4. 尿素標準應用液（5mmol/L）：取5.0ml貯存液用去氨蒸餾水稀釋至100ml。

二、實驗操作：

三、計算：

血清尿素氮 mmol/L=（測定管吸光度／標準管吸光度）×5

血清尿素氮 mmol/L= 尿素mmol/L×28

參考值：2.86--8.2 mmol/L尿素

l. 如果血清或血漿尿素氮超過400mmol/L時，則必須將標本用生理鹽水稀釋后再測定，結果乘以稀釋倍數報告之。

2. 微量吸管需要校正，吸管保持清潔干燥，加入樣本后顯色劑沿試管壁加入。

3. 試劑中加入硫氨脲和硫酸鎘，增進顯色強度和色澤穩定性，但仍有輕度褪色現象（每小時＜5％），加熱顯色冷卻后，應及時比色。

4. 尿液中尿素也可用此法進行測定，由于尿液中尿素含量高，標本應用蒸餾水作l：50倍稀釋，如果顯色后吸光度仍超過本法的線性范圍，還需將稀釋尿液再重稀釋，重新測定。