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  • 發布時間:2019-04-12 14:37 原文鏈接: 二氯熒光素量子產率的測定實驗

    實驗方法原理熒光分析法在有機電致發光、生物醫藥、臨床診斷等領域得到廣泛應用。高性能熒光材料的制備已成為這些領域的研究熱點與前沿,而這些熒光材料的熒光量子產率的高低直接影響它們的性能優劣。熒光量子產率(YF)即熒光物質吸光后所發射的熒光的光子數與所吸收的激發光的光子數之比值。它的數值在通常情況下總是小于1。YF的數值越大則化合物的熒光越強,而無熒光的物質的熒光量子產率卻等于或非常接近于零。

    熒光量子產率一般采用參比法測定。即在相同激發條件下,分別測定待測熒光試樣和已知量子產率的參比熒光標準物質兩種稀溶液的積分熒光強度(即校正熒光光譜所包括的面積)以及對一相同激發波長的入射光(紫外-可見光)的吸光度,再將這些值分別代入特定公式進行計算,就可獲得待測熒光試樣的量子產率:

    Yu = Ys*Fu/Fs *As/Au

    Yu、Ys -待測物質和參比標準物質的熒光量子產率;

    Fu、Fs -為待測物質和參比物質的積分熒光強度;

    Au、As -為待測物質和參比物質在該激發波長的入射光的吸光度(A=εbc)。

    運用此公式時一般要求吸光度As、Au低于0.05。參比標準樣最好選擇其激發波長值相近的熒光物質。有分析應用價值的熒光化合物的Yu一般常在0.1-1之間。
    實驗步驟

    1.配制二氯熒光素(0.25μg·mL-1)待測試樣溶液(含1.0mol·L-1 NaOH水溶液),羅丹明B(0.25μg·mL-1)參比標準溶液(溶劑為無水乙醇);

    2.打開分子熒光光譜儀和紫外-可見分光光度計;

    3.移取所需濃度的二氯熒光素與羅丹明B溶液,用相應溶劑稀釋至10.0 mL(A505nm<0.05),在紫外-可見分光光度計上測定其吸收光譜曲線;分別測定它們在505 nm處的吸光度。

    4.移取上述相同的溶液于熒光比色皿中,在熒光儀上分別掃描其熒光激發光譜及發射光譜;分別測定它們以505 nm為激發波長時的熒光發射光譜。

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    其他

    數據處理

    1.計算二氯熒光素和標準物質羅丹明B的熒光光譜的相對積分面積。

    2.從相關資料查閱參比標準物質羅丹明B在乙醇溶劑中的量子產率。

    3.將所獲得的各相關數據代入熒光量子產率計算公式計算二氯熒光素溶液的量子產率數值。


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