（1）致敏過程：消毒上臂內側皮膚，用一帶把的塑料或不銹鋼圓環（內徑為2cm面積約為3cm2）緊貼于上臂皮膚。用1ml注射器抽取適量致敏溶液，每0.1ml（含1～2mg DNCB）滴于圓環內皮膚表面，同時用橡皮頭吹散藥液，使之均勻涂布于圓環內皮膚表面。待丙酮揮發后取下圓環，表面以薄紗布輕輕覆蓋。24h后取下紗布。14天后觀察致敏部位有無自發發紅，如有反應，也為陽性反應，可用較低劑量進行攻擊試驗。
（2）攻擊過程致敏后14天，按上述致敏過程的操作方法用0.1ml，含50μg或100μg DNCB的藥液涂于前臂內側皮膚。