是兩個硫原子之間形成的共價鍵，一般指多肽鏈中的兩個半胱氨酸殘基側鏈的硫原子之間形成的共價鍵。
二硫鍵（disulfide bond）是連接不同肽鏈或同一肽鏈中，兩個不同半胱氨酸殘基的巰基的化學鍵。二硫鍵是比較穩定的共價鍵，在蛋白質分子中，起著穩定肽鏈空間結構的作用。二硫鍵數目越多，蛋白質分子對抗外界因素影響的穩定性就愈大。
二硫鍵結合能力較強，典型的二硫鍵鍵離解能為60 kcal/mol (251 kJ/mol)。由于二硫鍵比C-C鍵和C-H鍵弱40%左右，在許多分子中二硫鍵往往是”弱鍵”。此外，S-S鍵反映了二價硫的極化特性，容易被極性試劑（包括親電試劑和親核試劑，特別是親核試劑）切斷。
二硫鍵的長度約為2.05 A，比C-C鍵長約0.5 A。繞S-S軸旋轉的勢壘較低。二硫化物對接近90°的二面角有明顯的偏好。當角度接近0°或180°時，二硫化物是一種更好的氧化劑。
兩個R基團相同的二硫化物稱為對稱二硫化物的，例如二苯二硫和二甲基二硫。當兩個R基團不完全相同時，該化合物被稱為不對稱或混合二硫化物。
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