引言
隨著社會的發展,醫學整形美容、人工關節置換等手術已經不再是什么新鮮事物。但隨著手術的普及,出現人體植入物感染的病例頻頻發生,因重癥感染出現雙乳切除、截肢等負面新聞也見諸報端。
今天我們一塊探討一下“人體植入物標本”的細菌培養操作規程,以及檢驗結果如何解讀。如果有不同見解,可以在文末右下角點擊“寫留言”,也可以在“臨床微生物論壇”微信群一起討論。
接種與培養
接收標本后,立即對標本進行編號,然后在LIS系統中簽收。
將標本分別接種于血瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板,置于5%~10% CO2環境中35℃培養18~24h,觀察細菌生長情況。
菌落觀察及鑒定
觀察各種固體培養基上的細菌生長情況及其處理, 并將其記錄在程序單上(日期、涂片、分純、繼續培養、上機、手工生化、藥敏等)。
血瓊脂平板:打開血瓊脂平板首先觀察是否有細菌生長,如果有細菌生長,初步確認是陽性菌還是陰性菌,挑取可疑菌落涂片染色進一步確認。如果沒有菌生長,則繼續培養24h;
麥康凱瓊脂平板:觀察麥康凱瓊脂平板上有無細菌生長,如果有細菌生長(粉紅色、無色等其他顏色的菌落),進行生化鑒定和藥敏試驗,若沒有菌生長,則繼續培養24h。
鑒定:根據菌落觀察和涂片結果確認為陽性或陰性菌后,選擇合適的鑒定卡片,挑取菌落制成菌懸液,用微生物鑒定儀、傳統生化試驗、MALDI-TOF-MS進行鑒定。
結果報告
陽性結果
儀器報告細菌鑒定結果,需再次觀察原始平板上的菌落特征,判斷其與儀器結果是否相吻合,相吻合時才可以發出報告;不符合時再查找原因,是平板菌落不純還是機器鑒定結果有誤或者其他原因等。
膿液及傷口分泌物培養出的細菌或真菌均為病原菌,應進行鑒定藥敏試驗,報告菌名和藥敏試驗結果。
陰性結果
經培養48h,仍無細菌生長者,報告“培養2日無細菌生長”。
結果解釋
人工關節置術后感染,假體松動,傷口內有惡性液體流出。局部消毒后,用穿刺針穿刺關節液或手術中組織標本送細菌培養。
乳房植入物大多數最常見感染的原因是破裂、植入物周圍形成的膠原被摸攣縮以及感染。感染局部有分泌物直接取標本作細菌培養。
分枝桿菌也可引起乳房植入物感染,特別是龜分枝桿菌和偶發分支桿菌導致的感染。真菌如曲霉也可通過直接接種或在植入物填充物中休眠多個月后而感染植入物。放線菌是一種可通過胸壁侵蝕的細菌感染,并且據報告在少數情況下可表現為乳房腫物。
人體植入物引起的感染主要致病菌革蘭陽性球菌為主,包括金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌,鏈球菌和腸球菌為主;而革蘭陰性菌以鮑曼不動桿菌、銅綠色假單胞菌、大腸埃希菌等為主。其次分支桿菌和厭氧菌。
葡萄球菌屬多發生于假體周圍感染、糖尿病是極易繼發葡萄球菌感染的重要危險因素;同時葡萄球菌易于形成生物被膜且長期寄植于感染部位,難以清除。即使體外敏感的抗菌藥物如萬古霉素,也難于穿透而殺滅被膜內細菌,這也是導致假體周圍感染經久難愈的原因。而革蘭陰性菌中,銅綠假單胞和鮑曼不動桿菌也具有形成生物被膜的能力,故也同樣導致慢性感染而難于用藥物清除。
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