• <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 發布時間:2019-04-10 11:05 原文鏈接: 人胃癌高轉移模型的建立實驗

    人胃癌高轉移模型的建立可以:(1)研究腫瘤轉移機制;(2)研究腫瘤防治;(3)為腫瘤轉移研究提供更為理想的動物模型。

    實驗方法原理

    用人胃癌組織塊SGC-7901 原位移植于SCID小鼠,第4周末移植瘤向淋巴結和肝臟等器官轉移, 轉移率達66. 7%  ,第6 周末轉移率高達100%  。

    實驗材料

    雄性SPF級SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901

    試劑、試劑盒

    水合氯醛福爾馬林液

    儀器、耗材

    飼養籠光學顯微鏡石蠟

    實驗步驟

    一、實驗材料準備

    1.  雄性SPF 級SCID 小鼠,6~7 周齡, 體重20~25g 。

    2.  裸小鼠皮下傳代的人胃癌組織( SGC-7901,低分化腺癌) 。
     

    二、胃癌高轉移模型建立 

    1.  SCID 小鼠25 只, 隨機分為試驗組( n= 15) 和正常對照組( n= 10) 。

    2.  試驗組動物原位移植人胃癌組織SGC-7901:用4. 3%水合氯醛將動物麻醉后,依次切開左上腹皮膚、腹壁和腹膜, 仔細暴露胃壁,在胃大彎中部用剪刀損傷胃漿膜層( 直徑約3 mm),用絲線將人胃癌組織塊( 約5 mmx7 mm,重量為150 mg ) 縫在損傷處,然后將胃送入腹腔內, 用0 號縫線依次縫合腹壁和皮膚。

    3.  術后觀察動物麻醉情況,直至全部動物清醒后,送至飼養室。

    4.  正常對照組不作處理。

    5.  手術后第2、4、6 周末分別隨機處死試驗組動物2、3、2 只, 發現第6 周末2 只動物的癌腫均已轉移,故余下8 只SCID 小鼠也于第6 周末處死。

    6.  取胃局部生長的腫瘤組織、腫大淋巴結、腦, 及胸腔、腹腔內臟器, 以10% 福爾馬林液固定,石蠟包埋,常規制片,HE 染色,光學顯微鏡下觀察并記錄腫瘤生長和轉移情況。

    展開 
    注意事項

    組織轉移時應遵循嚴格的生物安全標準,避免組織污染。

    其他

    原位移植包括原位接種人類腫瘤細胞株,或原位移植人類腫瘤組織塊至裸鼠相應器官兩種方法。原位接種人癌細胞株可提高結腸癌、胰腺癌等少數腫瘤的轉移率,但不能提高胃癌等人類腫瘤在裸鼠的轉移率 。用人胃癌組織塊原位移植方法建立裸小鼠胃癌轉移模型,此法建立的模型癌轉移率高達100% ( 向淋巴結和肝、肺等臟器轉移)。原位移植癌組織塊至裸鼠相應的器官,可能由于保留了癌細胞之間的某些結構,移植癌能較好地反映人類腫瘤的浸潤、轉移特性。SCID 小鼠為重度聯合免疫缺陷小鼠,免疫功能較裸小鼠更為低下,因此更適宜作轉移模型。

    展開


  • <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 东京热 下载