就是Folin---酚法測定蛋白質含量
原理:磷鉬酸和磷鎢酸在堿性條件下,易被酚類化合物還原而呈藍色反應.蛋白質中含有代酚基的酪氨酸,故有此反應.Folin---酚法的靈敏度是雙縮脲法的100倍.
試劑:一:1,4%碳酸鈉;2,0.2N氫氧化鈉;3,1%硫酸銅;4,2%酒石酸鉀鈉.1和2等體積混合,3和4等體積混合,然后將兩液以50:1混合(甲).當天使用.二:1NFolin--酚試劑(乙).
方法:標準曲線;試管中加0、0.2、0.40、0.60、1.00毫升酪蛋白溶液(500微克/毫升),加水補足1毫升,平行做兩份.按序各加5毫升試劑(甲),搖勻,室溫置放10分鐘,再依次加入1N(0.5毫升)Folin----酚試劑(乙),搖勻,30攝氏度保溫30分鐘.然后在分光光度機上比色測定(A500).待測樣品如上反應和測定,對照標準曲線,得出含量.
注意:酚和檸檬酸對測定有干擾,低濃度尿素,胍,硫酸鈉,硝酸鈉,三氯乙烯,乙醇,乙醚,丙酮對顯色無影響.
LoWry法是雙縮脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的結合與發展。其原理是蛋白質溶液用堿性銅溶液處理后,堿性銅試劑與蛋白質中的肽鍵作用產生雙縮脲反應,形成銅—蛋白質的絡合鹽。再加入酚試劑......
一、實驗目的1、了解測定蛋白質的常用方法2、掌握蛋白質含量測定的經典Lowry–Folin法。二、實驗原理在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑......
【摘要】目的:制定宮頸癌片中蛋白質的含量測定方法。方法:采用Lowry法測定含量,以660nm為測定波長測定吸收度。結果:宮頸癌片中水溶性蛋白質在0.048~0.144mg/ml范圍內線性關系良好(r......