DNA測序技術系指分析DNA堿基構成和堿基順序的技術,即用于確定DNA片段中腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鳥嘌呤(G)、胞嘧啶(C)的構成和排列方式。
一般采用雙脫氧鏈終止法進行DNA測序。
其原理是利用2',3'-雙脫氧核苷三磷酸(2',3'-ddNTP)作為鏈終止試劑,通過DNA聚合酶催化和引物延伸產生一系列長度相差一個堿基的寡核苷酸,進行電泳分離,通過放射自顯影或熒光確定DNA的序列。
除雙脫氧鏈終止法外,DNA測序技術還包括邊合成邊測序、單分子實時測序、納米孔測序等技術。
DNA測序分析可分為手工測序和自動測序,當前以自動測序為主流。