如圖所示,這就是一個標準的real time-qPCR溶解曲線。下面從幾個方面來解讀:1、隨著溫度的升高,DNA雙鏈斷裂;接著溫度降低,到達退火溫度的時候,DNA雙鏈復性,熒光分子綁定在DNA雙鏈上,所以熒光信號值到達最高點。上面的是反映在擴增曲線上面的。2、接著DNA雙鏈分子由退火溫度約60度,繼續升溫,雙鏈斷開,DNA分子溶解。請注意溶解曲線的縱坐標,表示單位時間內熒光信號的變化量。當擴增產物特異,是單一產物的時候,這個縱坐標峰值所對應的橫坐標應該是一致的,即呈現單一的溶解峰,這個時候,在同樣的溫度下,可以認為是產物相同;如果溶解峰不單一,就意味有非特異性擴增。