傳出神經系統藥物對家兔離體腸管平滑肌的影響
實驗目的
1、掌握離體平滑肌的實驗方法。
2、觀察傳出神經系統藥物對離體家兔小腸平滑肌的作用
教學時數 2學時
實驗原理
一、 離體實驗
1、所用組織：心臟、膀胱、子宮、氣管、肺、腸等均可用于離體實驗
2、特點：實驗條件易于控制、操作簡便、結果準確、節省時間，可進行大量藥物的篩選。
3、要求：離體實驗需在一定生理環境下進行，模擬體內環境。
（1）溫度：38±0.5℃
（2）通氧氣：1－2氣泡/s
（3）營養液：含有一定離子和葡萄糖的溶液，不同的組織所選用的營養液不同。
二、離體腸管實驗
1、腸管的選擇：根據實驗目的的不同進行選擇
（1）小腸：十二指腸、空腸、回腸
（2）自律性：頻率較慢，起博點位于十二指腸，自律性自上而下漸弱。
（3）空腸多做定性實驗，回腸多做定量實驗
2、腸內受體及作用原理
（1）受體：家兔小腸平滑肌上存在α、β、M受體。
（2）作用：α、β受體興奮可使小腸平滑肌抑制而舒張；M受體興奮可使小腸平滑肌興奮而收縮。
（3）藥品對受體的作用：
1、氯化乙酰膽堿（Ach）：M受體激動劑，乙酰膽堿可興奮M受體，使小腸收縮幅度增加，蠕動加強。
2、阿托品(Atro)：M受體阻斷藥，為競爭性拮抗劑，單獨用藥對腸管無作用，可阻斷M受體，對抗乙酰膽堿的M樣作用，使腸管收縮幅度降低。
3、腎上腺素(Ad)：α、β受體激動劑，可激活α、β受體（主要是β2受體），α、β受體激動可產生與M受體激動相反的效應，表現為腸管舒張，小腸蠕動減弱。
4、氯化鈣（Bacl2）：①Ba2+進入細胞與鈣調蛋白結合，使平滑肌收縮，②Ba2+可使細胞膜發生去極化。所以加入Bacl2腸管會發生強直性收縮，Bacl2并非作用于受體，所以阿托品不能對抗這一作用。
實驗材料
1．動物：家兔
2．藥品①5X10-4氯化乙酰膽堿
②0.5％硫酸阿托品
③0.1%鹽酸腎上腺素
④20％BaCL2
3、器材：RM6240多媒體化生物信號記錄分析系統、PC80586計算機、張
力傳感器、保溫式麥氏浴槽、超級恒溫水浴、“L”型通氣鉤、高位吊瓶、量
筒、燒杯、培養器、氧氣瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科鑷子、縫衣針、棉線、
注射器、臺式營養器。
實驗方法
一、首先調試RM6240系統，使進入肌張力測定狀態．
1．在主菜單中用鼠標選擇<實驗>中的<消化>，選擇系統顯示<平滑肌生理特性>。
2．在界面右側控制參數區選擇<張力>,〈選擇3g〉,掃描速度1.0s/div,確定信號輸入，選擇〈通道2〉，在工具菜單選擇快速歸零（空載時鉤上無任何東西）。
3．在主菜單中選擇〈示波〉，進入示波狀態。
4．在主菜單中工具欄選擇〈網格切換〉對背景網格進行切換為細格，并在選項中選擇波形顏色紅色。
此時肌張力測試調試完畢。
二、調節儀器：
將超級恒溫水浴溫度調至38.5±0.5℃，向麥氏浴槽中加30ml臺氏液，通
入氧氣(1～2個氣泡／秒)并制備家兔腸管標本。
三、正式試驗：
將腸管標本兩端用縫針各穿一線，一端打一空結(約lcm小套)，另一端穿
上長線打結，用眼科鑷鉗住空結固定于通氣鉤上，放入麥氏浴槽中，將另端長
線的盡端打一空結，掛在張力換能器的小鉤上，調節換能器高度，使前負荷為1
g，穩定標本20分鐘。
在主菜單下按鍵選擇〈記錄狀態〉，先描記一段正常曲線，然后按下列順序給藥。
①向麥氏浴槽內加入5X10-4MAch0.2ml同時用標記框在屏幕上作給藥標記，觀察腸段反應。當反應最明顯時，用暫停鍵，將計算機轉入“示波狀態”。用臺氏液沖洗腸管3遍，穩定標本15分鐘，加入下列藥物。
②將系統重新轉入“記錄狀態”，描記一段正常曲線后，向麥氏浴槽中加
0．5％阿托品0．2ml并作標記，觀察曲線變化，1分鐘后加5X10-4MAch0．2ml
并標記，觀察腸段反應。將計算機轉入“示波狀態“后，用臺氏液沖洗腸管3
遍。穩定標本15分鐘
③將系統重新轉入“記錄狀態”，描記一段正常曲線后向麥氏浴槽中加0．01
％Adr0.1ml并作標記，觀察曲線變化。將計算機轉入“示波狀態”下沖洗腸管，穩定標本，加下列藥物。
④將系統重新轉入“記錄狀態”，描記一段正常曲線后，向麥氏浴槽中加
20％BaCl2 0．2ml并作標記，觀察曲線變化。
在主菜單下選擇“結束實驗”，激活工具欄，系統進入分析狀態。
實驗結果處理
在主菜單下分析項可選擇區域測量、標記查詢、開始反演、鼠標捕捉，測量后按工具欄中取消標志線，測出正常曲線，加Ach后，加阿托品回復后，加Adr后加BaCl2后腸管的收縮張力，分別求出加Ach、Adr、BaCl2所引起的張力變化值及Atro對Ach拮抗的張力回縮值，以全班數據進行統計，作t檢驗，并判斷各藥的作用是否顯著。
在主菜單下打印項進行打印模式設置，可倒入測量信息、學生實驗、實驗信息后，預覽、打印。
注意事項
1、操作時應避免牽拉腸管，造成腸管活性不好。
2、腸管兩端穿線采用十字交叉法，腸管不易扭曲，便于營養液的流通。
3、每次給藥前均應沖洗腸管3次，中間間隔1分鐘。