• <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 發布時間:2019-09-30 16:21 原文鏈接: 使用流式細胞儀進行人類單核細胞亞群的全血染色

    一、材料與試劑

    1. 抗體

    (1)鼠抗人CD56FITC(BD,340410)

    (2)鼠抗人CD2FITC(BD555326)

    (3)鼠抗人CD19FITC(555412)

    (4)鼠抗人CD14PerCP(Invitrogen,MHCD1431)

    (5)鼠抗人CD16PacBlue(BD,558122)

    (6)鼠抗人HLA-DRAPC-Cy7(BioLegend,307617)

    2. 其他材料

    (1)帶K3EDTA的玻璃全血管(BDVacutainer366450)

    (2)10×BDFACS裂解液(BDPharmigen349202)

    (3)20%甲醛(Tousimis1008A)

    (4)PBS(CalciumandMagnesiumfree,Gibco20012-027)

    (5)5 mL 聚丙烯管(BDFalcon352063)

    二、儀器

    1. BDLSRII流式細胞儀

    三、步驟

    1. 將人血加入到帶K3EDTA的玻璃全血管,然后輕搖幾次混合血液。

    2. 將100 ul 全血加入到5 mL 的聚丙烯管,并貼上標簽。

    3. 取各種抗體5 uL 到血樣中,輕拍管混合血樣。

    4. 室溫,黑暗孵育樣品。

    5. 加入2 ml 1×BDFACS裂解液(10×Solution dilutedin ddH2O)

    6. 混勻樣品三次,離心2~3 min。

    7. 室溫,1 200 rpm 離心7 min。

    8. 除去上清,用200 ul 2%甲醛重懸沉淀。

    9. BDLSRII流式細胞儀檢測樣品。

    10. 使用FlowJo分析數據。(TreeStar,Inc)



  • <noscript id="yywya"><kbd id="yywya"></kbd></noscript>
  • 东京热 下载