光學顯微鏡檢測腫瘤細胞形態實驗——HE染色法

腫瘤細胞

福爾馬林BSS蒸餾水蘇木精液伊紅染液丙酮二甲苯

光學顯微鏡樹膠載玻片蓋玻片洗瓶離心機離心管

一、具體操作

1.  準備組織切片。

2.  37℃溫BSS漂洗3次，每次2-3 min。

3.  中性福爾馬林固定30 min。

4.  蒸餾水漂洗1次。

5.  用蒸餾水稀釋的蘇木精液（1/20）染10 min。

6.  自來水洗。

7.  置人1%NaHCO₃液中漂洗至藍紫色。

8.  伊紅染液染30 s-1 min。

9.  蒸餾水洗。

10.  迅速通過丙酮2次，每次3-5 min。

11.  通過2:1丙酮-二甲苯3次，每次1-2 min。

12.  純二甲苯5-10 min。

13.  樹膠封片，即可鏡檢。

二、結果評價

細胞核染藍紫色，細胞質桃紅色。組織細胞排列緊密，凋亡細胞與正常細胞分離，胞核皺縮，但因與組織分離，凋亡細胞略顯大。

1. 整個操作動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞。

2. 操作時注意避光，反應完畢后盡快在一小時內檢測。

腫瘤細胞一般體積大，是正常細胞的3倍以上，核大，核畸形怪狀，染色深,和分裂相多見，而且多見病理性核分裂相.腫瘤細胞排列松散，容易脫落。腫瘤細胞核漿比例失調，細胞漿染色改變，或者出現空泡，癌細胞背景則是多有壞死。光學顯微鏡是利用光學原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細結構信息的光學儀器。通過光學顯微鏡檢測腫瘤細胞形態有兩種方法：HE 染色法和瑞氏和杰姆薩混染法。