1、一抗、二抗的稀釋度、作用時間和溫度對不同的蛋白要經過預實驗確定最佳條件。
2、顯色液必須新鮮配置使用，最后加入H2O2。
3、DAB有致癌的潛在可能，操作時要小心仔細。
免疫印跡法、ELISAs和免疫組化，往往需要幾個小時或幾天的孵育（incubation）。現在，美國華盛頓大學的科學家開發出一項新的技術，大大縮短了這一過程。在室溫下，與第一抗體孵育1小時，沖洗兩次，......
