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  • 發布時間:2022-02-10 13:07 原文鏈接: 免疫學實驗混合淋巴細胞培養試驗介紹

    混合淋巴細胞培養試驗介紹:

      混合淋巴細胞培養試驗(mixedlymphocyteculture,MLC)是一種測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容程度的試驗方法,常用于器官移植前的組織配型。混合淋巴細胞培養將供者與受者的淋巴細胞做雙向混合培養,或者滅活供者的淋巴細胞做向混合培養,細胞反應的程度與供-受者相容的程度呈負相關的試驗。

    混合淋巴細胞培養試驗正常值:

      形態計數法: 轉化率<10%;
      同位素計數法:比較cpm得出P>0.05。

    混合淋巴細胞培養試驗臨床意義:

      異常結果:
      腎移植時,活體供腎者的轉化率應<10%;尸體供腎者的轉化率應為>10%。只能在同一批實驗中選用低反應配組。淋巴細胞轉化率10%者為不同兩個體間的組織是相容的。 淋巴細胞混合培養試驗用以檢測患者的免疫狀態。T淋巴細胞數減少時,轉化率也降低。 可作為器官和骨髓移植的配型方法之一,用來選擇合適的供體。如轉化率高為供受者分歧用。轉化率低,移植后的成功率高。
      需要檢測人群:
      免疫力受損或者缺失的人群

    混合淋巴細胞培養試驗注意事項:

      檢查時:本試驗可作為器官移植篩選供體的方法,轉化率低者移植成功率高,轉化率高者成功率低。
      不適宜人群:排斥反應大的人

    混合淋巴細胞培養試驗檢查過程:

      (1)供體淋巴細胞的制備
      新鮮外周靜脈血按1∶1比例加在裝有比重為1.077的淋巴細胞分離液的離心管中,輕穩加在液面上 2000 r/min離心20 min,吸取中間霧狀淋巴細胞層,生理鹽水洗滌2次,臺盼藍染色,計數板計數。調整細胞密度為2×10^9/L,分成3管,各自離心,留取沉淀。 每管中加入250 μL絲裂霉素(終濃度50 mg/L)和1.75 mL生理鹽水,37℃水浴40 min, 生理鹽水離心洗滌2次。用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液調整細胞密度為1×1010/L。加入抗體封閉抗原,標記為D。
      (2)受體淋巴細胞的制備
      新鮮外周靜脈血按1∶1比例加在裝有比重為1.077的淋巴細胞分離液的離心管中,輕穩加在液面上, 2000 r/min離心20 min,吸取中間霧狀淋巴細胞層, 生理鹽水洗滌2次, 用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培養液調整細胞密度為1×1010/L, 標記為R。
      (3)混合淋巴細胞培養
      將已制備好的R和D按如下分組加入96孔板,置37℃,50 mL/L CO2孵箱中培養24 h。 A組:R 50 μL+D 50 μL;B組:R 50 μL+D 50 μL+IL?2純化中和mAb 15 μL;C組:R 50 μL+IL?2純化中和mAb 15 μL;D組:R 50 μL。 每組3個復孔,空白對照組為RPMI 1640培養液100 μL。

    相關疾病

      獲得性免疫缺陷綜合征的神經系統表現,免疫缺陷性肺炎,Ⅱ型免疫母細胞性淋巴腺病,Ⅰ型免疫母細胞性淋巴腺病,小兒血管免疫母細胞淋巴結病,小兒高免疫球蛋白E綜合征,小兒選擇性免疫球蛋白A缺乏癥,小兒選擇性免疫球蛋白G亞類缺陷病,小兒原發性免疫缺陷病,小兒繼發性免疫缺陷病

    相關癥狀

      免疫損害,免疫性腎炎,血清免疫球蛋白可升高,正常免疫球蛋白減少,免疫功能障礙,免疫缺陷,免疫力下降,免疫性溶血,免疫力降低


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