①所測定的只是細胞因子的蛋白含量，與其生物活性不一定成正比；
②測定結果與所用的抗體來源及親和力有很大的關系，使用不同來源親和力的單抗，對同一標本測到的結果可能不同；
③敏感性相對較低，比生物活性法約低10～100倍，測定下限一般為100pg；
④若標本中存在細胞因子的可溶性受體，可能會影響特異性抗體對細胞因子的結合。
