抗原抗體的比例 是濁度形成的關鍵因素。
當抗原過量時，形成的IC分子小，而且會發生再解離，使濁度反而下降，光散射亦減少，這就是高劑量鉤狀效應。當抗體過量時，IC的形成隨著抗原遞增而增加，至抗原、抗體最適比例處達最高峰，這就是經典的海德堡曲線理論。
在反應體系中需保持抗體適當過量，如形成抗原過量則造成測定的準確性降低。
