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  • 一、免疫熒光組織(細胞)化學技術的發展簡史

    免疫熒光組織化學是現代生物學和醫學中廣泛應用的技術之一,是由Coons和他的同事(1941)建立,免疫熒光技術與形態學技術相結合發展成免疫熒光細胞(或組織)化學。

    它與葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素與卵白素、植物血凝素(ConA等)相結合拓寬了領域;與激光技術、電子計算機,掃描電視和雙光子顯微鏡等技術結合發展為定量免疫熒光組織化學技術;熒光激活細胞分類器Fluorescin activated cell sorter(FACS)的應用,激光共聚焦顯微鏡的問世,使免疫熒光細胞技術發展到更高的階段,開創了免疫熒光技術的新領域。

    細胞顯微分光光度計與圖像分析儀的結合使免疫熒光組織化學的定量檢測更加準確。80年代到90年代相繼又有新的熒光素出現如R-藻紅朊、B-藻紅朊、C-藻青蛋白、cy2、cy3、cy5和cy7等均在流式細胞儀和激光共聚焦顯微鏡中廣泛應用。

    由于免疫熒光組織化學的特異性,快速性和在細胞水平定位的準確性,已在免疫學微生物學、病理學、腫瘤學以及臨床檢驗等許多方面得到廣泛應用,日益發揮重要作用。

    二、免疫熒光組織(細胞)化學的概述

    免疫熒光組織化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。

    在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素,熒光素受激發光的照射,由低能態進入高能態,而高能態的電子是不穩定的,以輻射光量子的形式釋放能量后,再回到原來的低能態,這時發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質和定位,以及利用定量技術測定含量。


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