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  • 發布時間:2024-05-16 17:45 原文鏈接: 全譜分析——探究小分子化合物的“大工具”

    樣品中如此微小的小分子化合物,究竟是如何進行分析的?

    代謝物全譜分析,通過色譜串聯質譜(HPLC-MS/MS)技術鑒定樣品中小分子化合物,從而達到對其進行定性定量分析的目的。利用超高效液相色譜質譜聯用技術對物質分離和鑒定,結合質譜數據庫信息注釋和分類,精準定性,幫助我們從整體上了解樣本的性質,詳細的描述樣本中的物質組成和含量等信息。


    01 檢測平臺


    02 技術流程

    ①樣品采集→②代謝物提取→③樣本預處理→④樣本檢測→⑤軟件定性定量


    03 代謝物定性定量方法


    (1)定性分析軟件

    使用Compound Discoverer 3.3 進行保留時間矯正、峰識別、峰提取等工作,根據二級質譜信息利用Compound Discoverer分析質譜原始數據,匹配Thermo mzCloud,、Thermo mzValut、ChemSpider等數據庫,獲得代謝物定性及定量數據。


    (2)代謝物定量計算方法

    A.相對濃度:根據各樣品中代謝物峰面積,計算代謝物在樣品中相對濃度。計算公式:各物質相對濃度=內標濃度/內標峰面積*代謝物峰面積/樣品取樣量,單位:μg/mL。

    B.相對百分比:根據各樣品中代謝物峰面積,計算代謝物在樣品中相對百分比。計算公式:各物質相對百分比=鑒定代謝物峰面積/代謝物總的峰面積*100%,單位:%。


    04 技術特點


    1. 較高的靈敏度、分辨率;

    2. 較寬的動態范圍;

    3. 適合于生物樣本中復雜代謝產物的檢測和潛在標志物的鑒定。


    05 應用方向


    1. 表型和生理功能研究;

    2. 中醫理論研究;

    3. 疾病病理研究;

    4. 食品科學與營養學研究;

    5. 臨床診斷及治療;

    6. 畜牧與農林業研究;

    7. 藥物研究;

    8. 環境毒理研究。


    06 送樣要求

    1. 血清、血漿:100ul/sample;-80℃保存,干冰寄送;若發生溶血,建議重新采樣。

    2.  尿液:1 mL /sample;-80℃保存,干冰寄送。

    3. 組織:200mg/sample;-80℃保存,干冰寄送。

    4.  細胞:≥1×10/sample;-80℃保存,干冰寄送。

    5.  腦脊液:400 ul /sample;-80℃保存,干冰寄送。

    6.  糞便及腸道內容物:200mg/sample;-80℃保存,干冰寄送。

    7.  植物樣本:鮮樣≥3g/sample,干樣≥1g/sample。

    8.  微生物樣本:≥1×10/sample;-80℃保存。

    9. 注:避免反復凍融


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