二硫鍵（disulfide bond） 是連接不同肽鏈或同一肽鏈中，兩個不同半胱氨酸殘基的巰基的化學鍵。二硫鍵是比較穩定的共價鍵，在蛋白質分子中，起著穩定肽鏈空間結構的作用。二硫鍵數目越多，蛋白質分子對抗外界因素影響的穩定性就愈大。
在化學中，二硫鍵指結構為R-S-S-R '的官能團。二硫鍵通常由兩個硫醇基團耦合而成。在生物學中，兩個半胱氨酸殘基中硫醇基團間形成的二硫鍵是蛋白質二級結構和三級結構的重要組成部分。此鍵在蛋白質分子的立體結構形成上起著一定的重要作用。
