1、初次使用亞葉酸鈣片，應在有經驗醫師指導下用藥。
2、亞葉酸鈣片不宜與葉酸拮抗劑(如甲氨喋呤)同時使用，以免影響后者的治療作用。應于大劑量使用甲氨喋呤24～28小時后應用本品。
3、當患者有下列情況者，本品應慎用于甲氨喋呤的"解毒"治療；酸性尿(pH<7)、腹水、失水、胃腸道梗阻、胸腔滲液或腎功能障礙。有上述情況時，甲氨喋呤毒性較顯著，且不易從體內排出；病情急需者，本品劑量要加大。
4、接受大劑量甲氨喋呤而用本品"解救"者應進行下列各種實驗室監測：
(1) 治療前測肌酐清除率；
(2) 應用甲氨喋呤大劑量后每12～24小時測定血漿或血清甲氨喋呤濃度，以調整本品劑量和應用時間；當甲氨喋呤濃度低于5×10-8mol/L時，可以停止實驗室監察；
(3) 應用甲氨喋呤治療前及以后每24小時測定血清肌酐量，如用藥后24小時血清肌酐量大于治療前50%，提示有嚴重腎毒性，要慎重處理；
(4) 甲氨喋呤用藥前和用藥后每6小時應監測尿液酸度，要求尿液pH保持在7以上，必要時用碳酸氫鈉和水化治療。