1、甲狀腺功能評估
放射免疫法可以測定T4，T3 和TSH。應該是所有水平降低，因TSH增高示原發性甲狀腺功能異常，用合成TRH200~500μg靜脈推注可以鑒別下丘腦病變抑或是垂體自身病變。TSH對TRH反應峰值一般見于注射后30分鐘，下丘腦疾病TSH呈升高延遲，遺憾的是,有些原發性垂體病的病人也有這種類型反應，另一些垂體病,TSH對TRH反應可以無任何TSH增加。
2、ACTH分泌的評估
一些腎上腺皮質功能減退病人基礎血皮質醇在正常范圍，但降低了貯備功能，對一個或更多ACTH-腎上腺軸心興奮試驗反應低下。評估ACTH(及GH和PRL)貯備的最可靠方法是胰島素耐量試驗，劑量為正規胰島素0.1u/kg體重，在15—30秒內靜脈推注,零時(胰島素推注前)，然后20、30、45、60和90分鐘采集靜脈血測定GH皮質醇和葡萄糖水平，如血清葡萄糖稍許下降未達50%至<40mg/dl(2.22mmol/L)，試驗應重復。(注意：該試驗對嚴重全垂體功能減退或DM和老年病人可有意外，對缺血性心臟病和癲癇病人是禁忌證。試驗過程中，應有醫護人員在旁)。通常僅有一過性多汗，心動過速，神經質。
3、PRL的評估
全垂體減退病人，PRL不總是被抑制.事實上，在下丘腦疾病由于喪失多巴胺對PRL抑制，可以有PRL增高。高催乳素血癥結果，常伴有促性腺激素過低和繼發性性功能減退。
4、GH的評估
成人不主張做GH缺乏常規篩選,因為即使發現GH缺乏，習慣上不作處理,除非骨骺尚未閉合的身材矮小病人。成人胰島素樣生長因子-1(IGF-1)正常提示不存在GH缺乏，然而低值不證明GH缺乏。
兒童中GH測定一般有幫助，但只有興奮試驗后才有意義。
正常反應的標準是人為決定，所有激發GH分泌試驗偶爾可以產生誤導結果。因為激發GH釋放沒有任何一個單獨試驗100%有效。
外源性GHRH評估GH分泌價值尚未定論。
已知激發試驗不能發現調節GH釋放的輕度缺陷，例如：繼發于GH分泌功能障礙的身材矮小兒童，GH釋放的激發試驗通常是正常。然而，12—24小時進行系列GH測定，指示這些兒童12—24小時GH分泌總和低于正常。
5、血清LH和FSH的評估
未用外源性雌激素更年期婦女，在基礎狀態測定這些激素對評估垂體功能減退最有幫助。這些更年期婦女，通常GnH是高的(>30mIU/ml)。測基礎LH和FSH對另一些人很少有幫助。雖然全垂體功能減退GnH低下，但與LH和FSH的正常值有重疊。
6、多種激素的評估
同時測定幾種垂體激素貯備是評估垂體功能最有效的方法。胰島素(正規胰島素0.1u/kg)，TRH(200μg)，GnRH(100μg)一起15—30秒鐘內靜脈推注，180分鐘內多次測定血糖、GH、TSH、PRL、LH、FSH和ACTH。