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  • 發布時間:2022-03-10 12:14 原文鏈接: 關于反轉錄酶的質量控制的介紹

      1.切口酶:在與200單位酶37oC保溫60分鐘后,超螺旋質粒保留在90%以上。

      2.DNase測定:200單位酶與50ng3H-DNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于1%。

      3.RNase測定:200單位酶與50ng3H-RNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于3%。

      4.第一鏈cDNA的反應:在標準化的反應中,200單位酶催化從1mg1.2kbRNA或1mg7.5kbRNA將同位素摻入到cDNA中,通過放射自顯影,對于1.2kb的RNA,產物cDNA是單一的、全長的條帶。對于7.5kb的RNA產物有部分是全長的條帶。用這二種RNA放射性轉換到cDNA中有12%。

      5.RNaseH活性:200單位酶與polyA:polydT37oC保溫60分鐘,釋放出的放射性要低于1%。

      6.物理純度:在SDS-PAGE上>90%純。儲存緩沖液:20mMTris-HClpH7.5;200mMNaCl;0.1mMEDTA;1mMDTT;0.01%NP-40(一種去垢劑)和50%甘油。反應緩沖液:250mMTris-HClpH8.3;375mMKCl;15mMMgCl2;50mMDTT(以Part#M531A供應)。

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