照高效液相色譜法（通則0512）測定。
1、供試品溶液：取頭孢噻肟鈉適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中約含頭孢噻肟1mg的溶液。
2、對照品溶液：取頭孢噻肟對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中約含頭孢噻肟1mg的溶液。
3、色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.05mol/L磷酸鹽緩沖液（取7.1g無水磷酸氫二鈉至1000mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，用磷酸調節pH值至6.25）-甲醇（85:15）為流動相，檢測波長為235nm，進樣體積10μL。
系統適用性溶液與系統適用性要求見有關物質項下。
4、測定法：精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算供試品中C16H17N5O7S2的含量。