關于實驗室移液器吸頭相關知識點您可知

　關于實驗室移液器吸頭工作原理、特性、用途應用范圍，您知道嗎?

　　移液器槍頭盒的作用是什么?盒子是用來保護吸頭，減少污染，有的吸頭盒蓋還可以客串樣品槽.

　　1. 使用合適的吸頭：

　　為確保更好的準確性和精度，建議移液量在吸頭的35%-100%量程范圍內。

　　2. 吸頭的安裝：

　　對于大多數品牌的移液器，特別是多道移液器，安裝吸頭并非易事：為追求良好的密封性，需要將移液套柄插入吸頭后，左右轉動或前后搖動用力上緊。也有人會用移液器反復撞擊吸頭來上緊，但這樣操作會導致吸頭變形而影響精度，嚴重的則會損壞移液器，所以應當避免出現這樣的操作。RAININ(瑞寧)的多道移液器沒有O型環，配合有前擋點的吸頭，只需輕壓一下即可達致理想密封，實在是多道移液器使用者的福音。

　　3. 吸頭浸入角度和深度：

　　吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內，保持豎直為佳;吸頭浸入深度建議如下所示：

　　移液器規格吸頭浸入深度

　　2L和10 L 1 mm

　　20L和100 L 2-3 mm

　　200L和1000 L 3-6 mm

　　5000 L和10 mL 6-10 mm

　　4. 吸頭潤洗：

　　對常溫樣品，吸頭潤洗有助于提高準確性;但是對于高溫或低溫樣品，吸頭潤洗反而降低操作準確性，請使用者特別注意。

　　5. 吸液速度：

　　移液操作應保持平順、合適的吸液速度;過快的吸液速度容易造成樣品進入套柄，帶來活塞和密封圈的損傷以及樣品的交叉污染。

　　【專家建議】：

　　1、移液時保持正確的姿勢;不要時刻緊握移液器，使用帶指鉤的移液器幫助緩解手部疲勞;有可能的話經常換手操作。

　　2、定期檢查移液器的密封狀況，一旦發現密封老化或出現漏液，須及時更換密封圈。

　　3、每年對移液器進行1-2次校正(視使用頻率而定)。

　　4、絕大多數移液器，在使用前和使用一段時間后，要給活塞涂上一層潤滑油以保持密封性;對于RAININ常規量程的移液器，不涂潤滑油也同樣擁有理想的密封性。

　　>>自動微量移液器再配以帶濾芯的吸頭是PCR實驗的*工具：

　　自動DNA合成儀合成的寡核苷酸引物無需進一步純化即可用于標準PCR。如果引物經過市售樹脂柱色譜(如NENSORB; NEN Life Science公司產品)或變性聚bxxa凝膠純化，從哺乳動物基因組模板擴增單拷貝序列的效率會更高(在第2章，方案3中)。

　　●模板DNA。模板可以是DNA的片段、制備的基因組DNA、 重組質粒，或者是任何其他含有DNA的樣本。模板DNA溶解于含有低濃度EDTA (<0.1mmol/L) 的10mmol/L Tris-Cl(pH7.6)。

　　●耐熱的DNA聚合酶。Taq DNA聚合酶是適用于大多數形式的PCR擴增階段的標準的、合適的酶。但是，當3'端錯配引物延伸可疑時，可優先考慮具有3'→5'校正活性的熱穩定DNA聚合酶(Chianget al.1993) (參見前頁“熱穩定DNA聚合酶”部分和信息欄“Taq DNA聚合酶”)。

　　Taq DNA聚合酶儲存于含有50%甘油的儲存緩沖液中。該溶液相當黏稠，難以用移液器進行準確吸加。辦法是用離心機將盛有酶的離心管在4'C高速離心10s，然后用正排量移液器吸取所需酶量。

　　●自動移液器。自動微量移液器再配以帶濾芯的吸頭是PCR實驗的*工具。帶有隔水屏障的一次性帶濾芯的吸頭可防止樣品液體不小心流入微量移液器，同時減少PCR與DNA樣品在實驗過程中存在交叉污染的可能性。

　　一：移液槍使用訣竅

　　1. 影響移液槍精度因素

　　(1)溫度：室溫低時，手溫較高，使得空氣膨脹，吸入冷溶液時往往發生誤差

　　(2)氣密性：tip和槍體的結合部，以及槍內柱體之間的長期磨損，造成誤差

　　(3)吸速：容易造成tip內氣泡產生，而且會污染槍頭

　　(4)試劑的揮發：吸揮發性高的試劑時，蒸汽進入槍頭，內壓增高，結果在壓出液體時，壓力變大，而產生誤差。解決辦法：反復抽吸4-5次就可改善。

　　2. 使用注意事項

　　(1)吸取液體時一定要緩慢平穩地松開拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。

　　(2)為獲得較高的精度，吸頭需預先吸取一次樣品溶液，然后再正式移液，因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時，吸頭內壁會殘留一層“液膜”，造成排液量偏小而產生誤差。

　　(3)濃度和粘度大的液體，會產生誤差，為消除其誤差的補償量，可由試驗確定，補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。

　　(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法，來校正取液器，1mL蒸餾水20℃時重0.9982g。

　　(5)移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的，長期操作會使內部零件松散而損壞移液器。

　　(6)移液器未裝吸頭時，切莫移液。

　　(7)在設置量程時，請注意?旋轉到所需量程?數字清清楚楚在顯示窗中?所設量程在移液器量程范圍內不要將按鈕旋出量程，否則會卡住機械裝置，損壞了移液器。

　　(8)移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體(如，濃酸、濃堿、有機物等)。

　　(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。

　　(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體，以免影響準確度。同時，如果需要移取量程范圍以外較大量的液體，請使用移液管進行操作。

　　二、移液器錯誤操作及處理方法

　　做為液體操作中常用的手動可調精密移液器，在使用過程中有些錯誤的操作會給操作本身帶來誤差，有些會造成機器的損壞等，在這里簡單總結如下：

　　錯誤：裝配吸頭時用移液器反復撞擊吸頭，以上緊

　　正確：插入吸頭，左右輕轉旋轉上緊吸頭

　　分析：撞擊會造成移液器內部齒輪組合的松動，長期操作會對移液器的性造成影響。

　　錯誤：吸頭與移液器不匹配，影響氣密性正確：選用與移液器匹配的，有質量保證的吸頭

　　分析：吸頭的不匹配，主要表現為對氣密性的影響。會直接影響移液器的準確性，通常會移液操作會小于設定量。

　　錯誤：吸液時，移液器傾斜吸液

　　正確：垂直吸液

　　分析：傾斜的狀態會造成氣壓面的改變。會對移液精度造成影響。

　　錯誤：吸頭內含有未打出的液體時，移液器平置于桌面

　　正確：將移液器垂直掛在移液器支架上

　　分析：吸頭內含有未打出液體，移液器平放之后液體有可能會流到移液器體內部，這會對移液器內部組件造成影響，嚴重的回造成損壞，較差污染等情況的發生。

　　錯誤：用大量程的移液器移取小體積的液體

　　正確：移液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內才符合不準確度和不準確的要求

　　分析：因為空氣墊的存在，是造成移液器不準確度的主要原因。移液器的選擇應該是大量程，靠近目的液體轉移量的選型原則。

　　錯誤：吸取具有強揮發性的液體

　　正確：不建議用普通移液器做強揮發型液體轉移

　　分析：如果一定要移取強揮發性的液體，應該在移液結束后立刻拆開移液器，讓蒸汽揮發，同時，建議使用外置活塞式移液器。

　　錯誤：吸液速度和放液速度過快

　　正確：慢吸慢放

　　分析：快吸對于1mL及以上量程的移液器，很容易造成液體上沖。過快的放液會增加液體的殘留量。