1、酸度
取己酮可可堿1.0g,加水50mL使溶解,立即加溴麝香草酚藍指示液1滴,溶液應顯綠色或黃色,用氫氧化鈉滴定液(0.01mol/L)滴定至顯微藍色,消耗氫氧化鈉滴定液(0.01mol/L)不得過0.2mL。
2、溶液的澄清度與顏色
取己酮可可堿1.0g,加水50mL使溶解,溶液應澄清無色,如顯渾濁,與1號濁度標準液(通則0902第一法)比較,不得更濃,如顯色,與黃色1號標準比色液(通則0901第一法)比較,不得更深。
3、溴化物
取本品0.50g,加水10mL溶解,加稀硝酸0.5mL與硝酸銀試液1mL,加熱至沸,放冷,加水稀釋成25mL,搖勻,與標準溴化鉀溶液11.0mL[每1mL標準溴化鉀溶液相當于0.01mg的溴(Br)],用同一方法制成的對照液比較,不得更濃。
4、有關物質
照高效液相色譜法(通則0512)測定。
溶劑:甲醇-0.544%磷酸二氫鉀溶液(1:1)。
供試品溶液:取本品,精密稱定,加溶劑溶解并定量稀釋制成每1mL中約含1mg的溶液。
對照溶液:精密量取供試品溶液適量,用溶劑定量稀釋制成每1mL中約含1μg的溶液。
對照品溶液:取可可堿對照品、茶堿對照品、咖啡因對照品與己酮可可堿對照品,精密稱定,加溶劑溶解并定量稀釋制成每1mL中各約含1μg的混合溶液。
色譜條件:用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑,流動相A為甲醇-0.544%磷酸二氫鉀溶液(3:7), 流動相B為甲醇-0.544%磷酸二氫鉀溶液(7:3),按下表進行梯度洗脫,檢測波長為272nm,進樣體積20μL。
系統適用性要求:對照品溶液色譜圖中,出峰順序為可可堿峰、茶堿峰、咖啡因峰與己酮可可堿峰。己酮可可堿峰的保留時間約為12分鐘,茶堿峰與咖啡因峰的分離度應大于10.0。
測定法:精密量取供試品溶液、對照溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。
限度:供試品溶液的色譜圖中如有與可可堿峰、茶堿峰或咖啡因峰保留時間一致的色譜峰,按外標法以峰面積計算,均不得過0.1%,其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液的主峰面積(0.1%),雜質總量不得過0.5%。
5、干燥失重
取己酮可可堿,在60℃減壓干燥至恒重,減失重量不得過0.5%(通則0831)。
6、熾灼殘渣
不得過0.1%(通則0841)。
7、重金屬
取己酮可可堿1.0g,加稀醋酸2mL與適量水溶解成25mL,依法檢查(通則0821第一法),含重金屬不得過百萬分之二十。