（1）抗生素效價實驗—取無菌平皿，加入20ml底層培養基，凝固后作為底層。
（2）抗生素效價實驗—用滅菌生理鹽水將短小芽胞桿菌的芽胞懸液稀釋至一定濃度以能得到清晰的抑菌圈，且標準品高濃度所得抑菌圈直徑在18~22mm為基準。用無菌吸管吸取1ml芽胞懸液，加入到200ml恒溫于50℃的上層培養基中搖勻，迅速以無菌吸管吸取5ml，注入到底層培養基上，鋪平待凝。
（3）抗生素效價實驗—在平板底部四邊，分別對角注明“SH”、“SL” 和“UH”、“UL”標記。
（4）抗生素效價實驗—鑷子火焰滅菌3次，然后夾取4個牛津杯垂直放置在平板中標志附近（注：勿使鋼管陷入培養基內，各小杯之間盡量等距）。
（5）抗生素效價實驗—以無菌滴管分別在每個牛津杯內加入相應的抗生素溶液至滿但不溢出管外，且四杯內液面高度相同，蓋上平皿蓋，靜置30分鐘。
（6）抗生素效價實驗—將平皿置于37℃恒溫培養箱培養16~18 h，量取各抑菌圈直徑（SH、SL、UH、UL），以毫米為單位，誤差不超過0.1mm。
（7）抗生素效價實驗—計算抗生素效價
（8）抗生素效價實驗—查放線圖計算抗生素效價