瓊脂糖凝膠電泳的儀器及試劑:
儀器設備應包括水平凝膠電泳槽及其配套電泳梳、穩壓電泳儀、微波爐或普通電爐。同時配備紫外線檢測儀和照相系統。
試劑包括瓊脂糖、電泳緩沖液、溴化乙錠溶液、凝膠加樣緩沖液。
電泳緩沖液常用TBE(1 000ml中含5.4g Tris,2.75g硼酸,2ml 0.5 mol/L EDTA,pH8.0)。
溴化乙錠(ethidium bromide,EB)是一種熒光染料,它可以嵌入核酸雙鏈的配對堿基之間,在電泳過程中隨核酸片段遷移,將凝膠置紫外光下,插入核酸鏈中的EB在紫外線激發下產生紅色熒光,可清楚顯示各核酸片段的遷移。EB見光易分解,應存棕色試劑瓶中于4℃下保存。由于 EB是一種強的誘變劑并有中度毒性,使用時必須戴手套操作。
1、瓊脂糖凝膠電泳—凝膠攝影需配置135照相機,全色135膠卷,照相機固定架,近攝鏡和紅色濾光鏡以及有機玻璃防護面罩。操作需在暗室進行,將相機固定好,把凝膠放在紫外檢測儀上適當位置,調焦,裝上紅色濾光......
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