一、氯化三苯基四氮唑法—種子測定的原理
有生活力的種子能夠進行呼吸代謝,在呼吸代謝途徑中由脫氫酶催化所脫下來?的氫酶催化所脫下來的氫可以將無色的2,3,5-三苯基氯化四唑還原為紅色、不溶性的三苯基甲臢,而且種子的生活力越強,代謝活動越旺盛,被染成紅色的程度越深,死亡的種子由于沒有呼吸作用,因而不會將TTC還原為紅色。種胚生活力衰退或者部分喪失生活力,則染色較淺或局部被染色。因此,可以根據種胚染色的部位以及染色的深淺程度來判定種子的生活力。
二、氯化三苯基四氮唑法—種子測定的試劑
0.5%TTC溶液;TTC溶液最好隨用隨配,不宜久藏。溶液應遮光貯藏。若已經變為紅色,則不能繼續使用。
三、氯化三苯基四氮唑法—種子測定的方法
1.浸種
將種子用溫水(30~?35℃?)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。
2.顯色
隨機取吸脹種子20粒,小心剝去種皮,務必不要傷害種胚。然后將處理好的種子置于小白瓷碗中,加入0.5%TTC溶液,以剛好浸沒水中煮5min后,再加入0.5%TTC溶液染色。
3.統計
染色結束后要立即進行鑒定,因放置太久會褪色。倒出TTC溶液,再用清水將種子沖洗1~2次,觀察種胚被染色的情況。凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生活力的種子,種胚不被染色的為死種子。根據上述標準鑒定煮沸和未煮沸種子的生活力。