兩個無關個體功能正常的淋巴細胞在體外混合培養時，由于HLAⅡ類抗原中D和DP抗原不同，可相互刺激對方的T細胞發生增殖，此為雙向混合淋巴細胞培養(two way MLC)；若將其中一方的淋巴細胞先用絲裂霉素C(mytomycine C)處理或射線照射使之細胞中DNA失去復制能力，但仍能刺激另一方淋巴細胞發生轉化，稱為單向混合淋巴細胞培養(one way MLC)。兩個個體間HLA抗原差異程度越大，反應越強烈，可通過細胞數量、形態檢查或3H-TdR摻入率檢測反應細胞的增殖水平。如用經照射的、已知D位點抗原的純合子分型細胞(Homozygous typing cell,HTC)作為刺激細胞，則可檢測待檢者的D位點抗原型別。若待檢者抗原與標準HLA-D抗原相同，MLC不發生增殖，此為HLA-D抗原陰性分型法。EB病毒轉化的B淋巴母細胞表達高水平的HLAⅡ類抗原，常作為單向混合淋巴細胞培養中的刺激細胞。