1.血清促甲狀腺素和甲狀腺激素
所有甲狀腺結節患者均應進行血清TSH和甲狀腺激素水平測定。血清甲狀腺激素水平增高，TSH降低，提示甲狀腺結節為自主高功能性結節，絕大多數為良性結節。甲狀腺惡性腫瘤患者甲狀腺功能絕大多數正常。
2.血清降鈣素水平的測定
有甲狀腺髓樣癌家族史或多發性內分泌腺瘤病家族史者，應檢測基礎或刺激狀態下血清降鈣素水平。如血清降鈣素水平明顯升高提示結節為甲狀腺髓樣癌。
3.甲狀腺超聲檢查
高清晰甲狀腺超聲檢查是評價甲狀腺結節最敏感的方法。它可判別甲狀腺結節性質，如結節的位置、形態、大小、數目、結節邊緣狀態、內部結構、回聲形式、血流狀況和頸部淋巴結情況。對甲狀腺囊腫性結節具有可靠診斷價值。也可用于超聲引導下FNAC檢查。
4.甲狀腺核素顯像
對甲狀腺結節的診斷敏感性并不強，但此檢查方法的特點是能夠評價結節的功能。依據結節對放射性核素攝取能力將結節分為“熱結節”、“溫結節”和“冷結節”。