1.保證抗菌藥物質量
抗菌藥物應直接從廠商或相關機構獲取，實際濃度依據說明書進行換算，藥品應按照說明書要求或于-20℃下干燥冷藏，制備好的藥液應無菌并至少為-60℃冷凍保存，融化后應24小時內使用，未使用的不可再次使用。
2.培養基的要求
肉湯稀釋法中，非苛養菌可選擇陽離子調節的MH肉湯，對苛養菌中有特殊要求的如嗜血桿菌屬、鏈球菌屬可分別選擇HTM培養基、含5%脫纖維馬血CAMHB。瓊脂稀釋法中，一般選擇MHA瓊脂，特殊細菌如淋病奈瑟菌則用含1%生長因子的GC瓊脂。檢測葡萄球菌對苯唑西林、甲氧西林、萘夫西林的敏感性時，培養基中須含有最終濃度為2%的NaCl。
3.結果分析
如結果觀察到跳孔現象應檢查培養物純度或重新進行試驗。