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  • 發布時間:2024-07-10 19:52 原文鏈接: 關于紫外光顯微鏡的原理介紹

      紫外光顯微鏡是使用波長在380-360nm以下的紫外光形成像的顯微鏡,這種顯微鏡最初被設計用來增大分辨力,它主要用于對紫外光有選擇吸收物質的顯微分光光度測量。

      在紫外光顯微鏡中,首先遇到的是載玻片、蓋玻片和透鏡的材料問題。由于大多數普通玻璃大量地吸收340nm以下波長范圍的光,紫外光不能透過玻璃透鏡形成像;而且所有的透明塑料也具有相同的透射特性,因此不得不使用石英(可透過低達200nm的紫外光)、熒石(可透過低達185nm的紫外光)或鏗熒石等價格昂貴的材料,用這些材料已經能夠制造出具有短焦距和高數值孔徑的紫外光物鏡。另外,必須使用在紫外光區域能夠發射足夠數量輻射能的高壓氣體放電燈,一般白熾燈在紫外光區域內的輻射產量幾乎等于0。在紫外光顯微鏡中所使用的標本必須枯在石英載玻片和石英蓋玻片之間,石英載玻片比一般玻璃載玻片小而且薄,尺寸為25 x 37.5 x 0.5mm,石英蓋玻片也必須比一般玻璃蓋玻片薄得多,大約為0.025mm。使用這種蓋玻片必須矯正紫外光物鏡。此外,封藏介質和浸潤液也必須是能夠透過紫外光的,一般使用無水甘油。

      在奧林巴斯顯微鏡問世之前,人們把提高顯微鏡分辨力的希望自然寄托在使用具有更短波長的紫外光上。早在1904年柯勒就已制造出了用于紫外光的石英物鏡,這種物鏡可以透過從一個弧光燈中分離的波長275nm的紫外光,并且對球面差有一定的矯正。使用紫外光顯微鏡,在分辨力上確實顯示出某種程度的提高,這一點是不可懷疑的。使用波長為265nm的紫外光拍攝未染色的人骨髓細胞涂片時,由于細胞核中的核酸顯示強烈的吸收,細胞核顯示出清晰的核質結構和較高的分辨力,盡管照片使用了很高的放大倍數,但沒有出現空放大。

      然而,紫外光顯微鏡在分辨力上的增大并不能達到令人滿意的程度。首先由于波長對場深的直接影響,分辨力的增加必須要求很薄的物體標本。

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