1.病毒分離
大多數埃可病毒可用猴腎細胞培養分離，如加用人胚肺細胞株W1～38則效果更好。
2.血清學檢查
恢復期血清抗體效價比急性期升高4倍有診斷價值，中和實驗是最常使用的病毒鑒定方法，部分血清型如3、6、7、11～15、19～21、24、29型可用血凝抑制試驗進行診斷。用聚合酶鏈反應檢測病毒RNA是快速敏感的方法。
3.X線
引起肺炎者，胸部影像學可見異常改變。
