應用重氮甲烷的甲基化反應，尤其是羧酸氧原子的甲基化以保護藥物分子中的羥基或羧基。該反應主要特點是反應速度快，條件溫和，操作簡便，反應過程中除放出氮氣外，并無其它的副產物生成，幾乎定量轉化，產品純度高，而且對手性中心沒有影響。由于藥物分子結構復雜，具有各種不同性質的官能團，因此，此類保護反應常應用于藥物合成中。醇為中性物質，通常情況下不與重氮甲烷反應，但在路易斯酸催化下反應則能順利進行。如甾體化合物3-位羥基保護反應。
